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有没有人用过甲醇做GPC流动相?

  • 骑乌龟去流浪
    2013/10/16
  • 私聊

凝胶色谱(GPC)

  • 有没有人用过甲醇做GPC流动相?所选的标准品是什么呢?我试了PEG(安捷伦标样红、黄、绿三瓶)和PMMA,但是PEG只成一个峰出来,而PMMA没有响应。进空白甲醇时,在RT0~2min有个包,所有样品在这个位置都有个包。谁能解个疑,十分感谢!检测器为示差折光,柱子是PLgel 5um MIXED-C.
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  • 老多_小多

    第1楼2013/10/16

    甲醇做流动相,极性不行吧

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  • 小不董

    第2楼2013/10/16

    应助达人

    没用过直接甲醇作流动相的,极性很大,没见过用甲醇的,pl-aquagel水相的可以加到40-50%的甲醇。极性就用DMAC或者DMF不行吗?

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  • 小不董

    第3楼2013/10/16

    应助达人

    如果真要用甲醇,也要加盐的,可能需要的浓度还不能太小。

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  • 小不董

    第4楼2013/10/16

    应助达人



    我查看了PL的GPC色谱柱,没有用甲醇的案例,可以选择上图中的良溶剂最为流动相。

    另根据你样品的分子量范围参考右图中来选择柱子。

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  • histone1

    第5楼2013/10/16

    什么样品一定要用MeOH来测GPC?

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  • 骑乌龟去流浪

    第6楼2013/10/17

    试过DMAc,出峰会提前,本应该是几万的样品,测出来几百万,而且PD很大,快到10了。就是我跟你说过的水相测不好的涂料样品,以前有将样品处理后制成能溶于THF的衍生物,测出来最多几千到几万,估计实际样品分子量应该不会差太多吧。你倒提醒了我,也许可以再用pl-aquagel的柱子,走水和甲醇的混合流动相。

    再有一个问题,国庆后脱气机故障了,后来刚好新装2台HPLC,就把其中一台暂时用不上的HPLC上的泵模块(带seal wash)整个换到了GPC上,先用着。但是发现基线很不好,冲很久的柱子和流通池,基线的波动都在100mv,这以前从来没有出现过。而且昨天测PVDF的时候,用的都是同一种DMAc,前处理方法什么的都一样,计算方法也一样,但测出来的结果跟国庆节前(就是仪器没坏前)相差了好几万,样品本身也就10W到30W左右,是同一批样品,这样的差距有点让人接受不了了。会是什么原因呢,难道换个泵模块就会导致这么大的影响?或者我应该重做一次标准曲线?但是基线突然不好是什么原因呢?

    小不董(doxw0323) 发表:没用过直接甲醇作流动相的,极性很大,没见过用甲醇的,pl-aquagel水相的可以加到40-50%的甲醇。极性就用DMAC或者DMF不行吗?

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  • 骑乌龟去流浪

    第7楼2013/10/17

    因为出峰好我也是在瞎用

    histone1(histone1) 发表:什么样品一定要用MeOH来测GPC?

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  • 骑乌龟去流浪

    第8楼2013/10/17

    加盐的话一个个加哪种盐?我一看到盐就头痛了

    小不董(doxw0323) 发表:如果真要用甲醇,也要加盐的,可能需要的浓度还不能太小。

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  • 小不董

    第9楼2013/10/17

    应助达人

    更换过了,就要重新 做曲线。

    骑乌龟去流浪(v2781583) 发表:试过DMAc,出峰会提前,本应该是几万的样品,测出来几百万,而且PD很大,快到10了。就是我跟你说过的水相测不好的涂料样品,以前有将样品处理后制成能溶于THF的衍生物,测出来最多几千到几万,估计实际样品分子量应该不会差太多吧。你倒提醒了我,也许可以再用pl-aquagel的柱子,走水和甲醇的混合流动相。

    再有一个问题,国庆后脱气机故障了,后来刚好新装2台HPLC,就把其中一台暂时用不上的HPLC上的泵模块(带seal wash)整个换到了GPC上,先用着。但是发现基线很不好,冲很久的柱子和流通池,基线的波动都在100mv,这以前从来没有出现过。而且昨天测PVDF的时候,用的都是同一种DMAc,前处理方法什么的都一样,计算方法也一样,但测出来的结果跟国庆节前(就是仪器没坏前)相差了好几万,样品本身也就10W到30W左右,是同一批样品,这样的差距有点让人接受不了了。会是什么原因呢,难道换个泵模块就会导致这么大的影响?或者我应该重做一次标准曲线?但是基线突然不好是什么原因呢?

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  • tigertooth

    第10楼2013/10/21

    从理论上讲,只要柱子和样品都适用甲醇就可以,但标样的确不好找。
    DMAC应该加溴化锂,否则由于氢键的问题会有诡峰,造成分子量变得很高。
    泵模块换了,系统的变化会很大,必须重做标线。

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