新色谱柱出现主峰分叉

虽然pH值在色谱柱的使用范围内，但酸性较强也损伤色谱柱，建议用pH值约为7.5的流动相冲洗色谱柱。

给出的pH范围是色谱柱的耐受极限，一般不建议使用pH太低的流动相。

不就是0.1%的TFA吗，没什么问题，这个流动相很常见。我倒是觉得这稀释剂很奇葩。虽然出峰时间是20min，出现溶剂效应的可能比较小，但是还是可以做个试验确认下，不妨将稀释剂的乙腈比例减小看看。

出现峰分叉可能的原因有：
1、保护柱或分析柱污染。既然确定样品纯度高，可以取下保护柱再试试看。
2、样品溶剂不溶于流动相。如果可能，采取流动相作为样品溶剂。

个人觉得第二个可能性比较大，溶剂与流动相不互溶，使样品无法均匀分布，经常出现分叉的情况。

换溶剂溶解！

应助达人

PH应该没有问题，是不是色谱柱被污染了，建议把色谱柱清洗一下。