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求助:吸光度

紫外可见分光光度计(UV)

  • 今天测麦芽糖酶的浓度时做标准曲线,测出的吸光度全是负值,且浓度越大吸光度越小.曲线的相关系数是0.9989.使用仪器型号的是Lambda25.
    哪位大侠给解释一下,这是怎么回事?
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  • haypiny

    第1楼2006/08/13

    波长搞错了吧,还是参比不对?

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  • xl1209

    第2楼2006/08/13

    波长是按书上说的508nm,参比溶液和做标准曲线的标准溶液配置基本一样,只是不含要测的麦芽糖,这种参比应该成为试剂空白吧?我感觉参比溶液应该也没问题.郁闷!

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  • 初学者&九点虎

    第3楼2006/08/13

    那就是空白的问题,空白的吸光度比样品溶液的吸光度大,出来的就是负的.

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  • xl1209

    第4楼2006/08/15

    问题解决了,是我操作方法不对.今天问工程师,他说lambda25是双光路的,有两个池,参比和样品都放在第一个池里测,不要用第二个池.我按他说的做了一下,果然可以了,是正值.以前没见过这种用法,说明书上也没看到,当时工程师调试在场的老师也忘掉了操作方法,于是我按一般的紫外光度计操作,在第一个池里放参比调零,然后在第二个池里放样品溶液,结果就出现了负值的情况.
    现在可以正确操作了,不过搞不明白,第二个池是干吗用的,知道的给解释解释.谢谢!

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