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两类抗生素过柱后上机检测结果很不好。。。

液质联用(LCMS)

  • HELP~~~

    我把100ppb的四环素类和磺胺类抗生素的混标1ml稀释到50ml,过6ml的HLB柱子之后用20ml甲醇洗脱,氮吹浓缩到1ml,上LCMSMS检测,发现磺胺类的只有一半量还不到,四环素类的几乎就是没有,这是什么原因呢?

    难道是之间的氮吹浓缩时间太长,导致四环素类发生变化无法被检出?TAT

    我现在是按照文献上方法做的,可是结果总不好,如果连检测都成问题的话,接下去实验就没法做了。。。

    前辈们对此有没有什么建议?
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  • sukiliang

    第1楼2014/03/06

    = =!哇,回收率这低?感觉是不是洗脱不下来?

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  • new2013

    第2楼2014/03/06

    我感觉也是洗脱这个原因比较主要,因为混标除了过柱、浓缩就没有其他过程了,之前用土壤样品经过前处理之后也没测出来,那个还有各种过程损失什么的。但文献上几乎都是用甲醇洗脱的。

    sukiliang(sukiliang) 发表:= =!哇,回收率这低?感觉是不是洗脱不下来?

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  • sukiliang

    第3楼2014/03/06

    试试用其他洗脱溶剂看看会怎么样!

    如果是混标的话试试不同柱子看看哪个回收率好

    new2013(v2788008) 发表:我感觉也是洗脱这个原因比较主要,因为混标除了过柱、浓缩就没有其他过程了,之前用土壤样品经过前处理之后也没测出来,那个还有各种过程损失什么的。但文献上几乎都是用甲醇洗脱的。

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  • hujiangtao

    第4楼2014/03/06

    应助达人

    楼主试试接一下滤液,看看是不是柱子没保留住?

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  • new2013

    第5楼2014/03/06

    淋洗液有接过的,是10ml水淋洗,检测过没有。甲醇的洗脱体积本来是10ml,增加到20ml,后面单独接了5+5,基本可以确定20ml够了。

    hujiangtao(hujiangtao) 发表:楼主试试接一下滤液,看看是不是柱子没保留住?

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  • new2013

    第7楼2014/03/06

    计划增加洗脱液种类,看看效果吧。柱子太贵了,按照文献是都可以的,换洗脱液成本会低点。。。

    sukiliang(sukiliang) 发表:试试用其他洗脱溶剂看看会怎么样!

    如果是混标的话试试不同柱子看看哪个回收率好

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  • new2013

    第8楼2014/03/06

    真郁闷,做不出来的压力好大,就怕被老师骂。重要的是还不知道哪里不对、哪里需要改进。。。

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  • ie4680180

    第9楼2014/03/06

    应助达人

    用3比1的乙腈甲苯试试,或二氯甲烷+乙酸乙酯(95:5)。

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  • wuyuandaai

    第10楼2014/03/13

    这个我做过,吹的时候,控制温度!回收虽然没有100那么高,但是不会像你说的那样一半不到呢!

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  • new2013

    第11楼2014/03/16

    嗯,这次用了含0.1%甲酸的甲醇洗脱,有一半多了。温度我就控制在40摄氏度,不吹干。

    wuyuandaai(wuyuandaai) 发表:这个我做过,吹的时候,控制温度!回收虽然没有100那么高,但是不会像你说的那样一半不到呢!

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