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紫外可见分光光度计(UV)
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【求助】斐林试剂法测定还原糖碰到了些问题,望高手们给与指点
colourful_life
2006/08/18
私聊
紫外可见分光光度计(UV)
这两天用斐林试剂法测定发酵液中的还原糖含量,首先做标准曲线,我用的标准曲线梯度(0~6号)分别是:0, 0.05%, 0.1%, 0.2%, 0.3%, 0.4%, 0.5%。用590nm扫描反应的上清液,结果发现前四个浓度(0~3号)曲线的线性还比较好,但从0.3%开始,后三个的紫外扫描的OD值为负值,且0.3%的浓度的最低。我不知道是什么原因造成负值,这正常吗?
看反应的上清液,颜色从0~3号蓝色依次递减,4号(0.3%)几乎无色,5、6号颜色转为淡黄色,且依次递深,这又是什么原因呢?各位做的时候出现过这种情况吗?
看反应之后的砖红色沉淀又是0~6号依次增多的啊。
做了两次都是这样,不同的人操作的。我真是不明白了。
恳求这里的高手们能否与弟子讨论下这些问题呢?
谢谢了!
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