检测食品中过氧化氢除了用试剂盒还有其他方法吗？

sunboy76792008 2014/03/17

过氧化氢(H2O2),俗名双氧水,是一种强氧化剂,具有消 毒、杀菌、漂白等功能,在工业及医疗领域广泛使用。在食品 工业中,过氧化氢主要用于软包装纸的消毒、罐头厂的消毒、奶和奶制品杀菌、面包发酵、食品纤维的脱色等,同时也用作食品工业中的一种辅料,当作小麦粉、食用油、琼脂、蛋白、干酪等食品的漂白剂和抗菌剂。《中华人民共和国国家标准食 品添加剂使用卫生标准》中明确规定,在加工食物的过程中,双氧水的使用量不应超过限制使用量。美国及其他国家也分 别制定了过氧化氢在不同食品中的使用标准。但我国和国际 组织均未制定固体食品中过氧化氢的测定方法。因此,在食 品检测中建立一种简便、准确的过氧化氢检测方法很有必要。 目前,过氧化氢的测定一般采用碘量法[1,2]和吸光光度 法[2～4] 本文选用可见分光光度法测定食品中过氧化氢,并对其波长、最佳线性范围、显色剂用量及比色时间等实验条件 作了进一步探索,确立了分光光度法测定食品中过氧化氢的 最佳实验条件。1　材料与方法111　原理过氧化氢在酸性溶液中,与钛离子生成稳定的橙色络合物,其吸光度与样品中过氧化氢含量在一定范围内成线性关系,可计算出样品中过氧化氢的浓度。反应式如下:Ti+4+ H2O2+2H2O→H2TiO4+4H+。112　仪器与试剂11211　仪器　DU-640型紫外可见分光光度计( BECKMAN?美国)。11212　试剂　除非另有说明,在分析中仅使用确定为分析纯(或以上)的试剂和蒸馏水或相当纯度的水。钛溶液:称取二 氧化钛( TiO2)110g于250ml三角烧瓶中,加硫酸铵410g,硫酸100ml,上置小漏斗,置150℃沙浴中加热15h,冷却后 倾入4倍水中。硫酸铵:AR。110mol/L硫酸:量取30ml硫酸,缓缓注入适量水中,冷却至室温后用水稀释至1000ml。011mol/L高锰酸钾标准溶液:称取约313g高锰酸钾,加1000ml水,煮沸15min,加塞静置2d以上,用垂融漏斗过 滤,置于具玻璃塞的棕色瓶中密塞保存。标定:准确称取约012g在110℃干燥至恒量的基准草酸钠,加入250ml新煮沸 过的冷水,10ml硫酸,搅拌使溶解,迅速加入约25ml高锰酸钾溶液,待褪色后,加热至65℃,继续用高锰酸钾溶液滴定至溶液呈微红色,保持015min不褪色。在滴定终了时,溶液温度应不低于55℃,同时做空白试验。高锰酸钾标准溶液的浓度按下式计算: c= m ( v-v0)×010670式中: c—高锰酸钾标准溶液的实际浓度,mol/Lm—基准草酸钠的质量,gv—高锰酸钾标准溶液用量,ml v0—试剂空白试验中高锰酸钾标准溶液用量,ml 010670—与1100ml高锰酸钾标准溶液( 1mol/L )相当的 基准草酸钠的质量,g过氧化氢标准贮备液:吸取过氧化氢( 30% ) 110ml用水 稀释至100ml。准确吸取20ml稀释液于150ml三角烧瓶中,加210mol/L硫酸25ml,用011mol/L高锰酸钾标准溶液滴定至溶液呈微红色。保持015min不褪色。同时做空白试验。过氧化氢标准贮备液的浓度按下式计算: a= n×v×17101 20式中: a—过氧化氢标准贮备液浓度,mg/mln—高锰酸钾标准溶液浓度,mol/Lv—高锰酸钾标准溶液用量,ml17101—过氧化氢的克当量,g过氧化氢标准应用液( 100μg/ml ) :临用时,用水按下式 稀释为100μg/ml。v= 100×011 w式中: v—配制100ml过氧化氢标准应用液( 011mg/ml )应取过 氧化氢标准贮备液的毫升数w—过氧化氢标准贮备液每毫升所含过氧化氢的毫克数9 701中国卫生检验杂志2006年9月第16卷第9期　ChineseJournalofHealthLaboratoryTechnology,Sep2006;Vol16　No9113　实验方法11311　样品前处理　一般试样:称取搅碎均匀样品2150～5100g于烧杯中,用水溶解并定容至5010ml。浸泡30min后,用干燥滤纸过滤(如样品溶液有颜色,可加入粉末活性炭 脱色后再用干燥滤纸过滤)弃初滤液,滤液待用。 乳及乳制品:吸取牛乳25100～50100ml或称取2150～5100g婴、幼儿奶粉,置于200ml容量瓶中,加50ml,50℃～55℃热水,缓缓加入乙酸锌溶液和亚铁氢化钾溶液各1010ml,加水至刻度。混匀,沉淀,静置30min。用干燥滤纸 过滤,弃初滤液,滤液待用。水发产品:直接吸取浸泡液或将试样绞碎搅匀,称取2150～5100g,置于锥形瓶中,加50ml水,置振荡器上振荡、浸渍30min后,用干燥滤纸过滤,滤液待用。11312　标准曲线的绘制　在6个25ml比色管中依次分别加入过氧化氢标准应用液0100,0125,0150,110,310,510ml (相 当于过氧化氢0100,2510,5010,10010,30010,50010μg ) ,加水 至1010ml。各加钛溶液510ml,加水至刻度,于室温下放置30min。于波长410nm处,用1cm比色皿,以试剂空白作参比,在分光光度计上分别测定其吸光度。以吸光度对过氧化氢含量,绘制标准曲线。11313　样品测定　准确吸取样品滤液5100～1010ml及同量 的试剂空白液,分别置于25ml比色管中,加钛溶液510ml,加 水至刻度,于室温下放置30min。于波长410nm测定,以测得的吸光度值从标准曲线上查出对应的过氧化氢含量(μg )。11314　计算　X= A×1000 m×V 50×1000式中: X—试样中过氧化氢的浓度,mg/kg或mg/LA—查标准曲线所得测试样液中过氧化氢含量,μgm—试样质量,g 2　结果与讨论211　最大吸收波长的选择 吸取110ml过氧化氢标准溶液( 100μg/ml ) ,经显色反应 后在400～900nm波长扫描,结果在410nm有最大吸收峰。 亦有文献报道为430nm[2]。本实验选择测定波长为410nm。212　最佳线性范围选择在试验条件下,于8个2510ml比色管中依次分别加入过氧化氢标准应用液0100,0125,0150,110,210,310,410,510, 710,910ml (过氧化氢含量分别为010、25、50、100、200、300、400、500、700、900μg) ,比色测定。测定结果见图1。图1　过氧化氢浓度与吸光度的关系由上图可见,当过氧化氢含量在2510～90010μg时,相关 系数r=019783;当过氧化氢含量在2510～70010μg时,相关 系数r=019924,曲线从700μg时向下漂移,当过氧化氢含量 在2510～50010μg范围内,与△A成良好的线性关系。其回归方程为Y=010024+010941X,相关系数r=019993,相关性最好,因此本实验选择过氧化氢含量在2510～50010μg范围测定。213　显色剂用量选择在相同实验条件下,测量体系加一定量已知标准溶液,测试显色剂溶液用量对吸光度的影响(表1 )。表1　钛溶液加入量对吸光度的影响 钛溶液( ml ) 310510710 A (λ=410nm ) 010975010998010980由表1可见,当钛溶液加入量为510ml时,其吸光度值最 大( 010998 )。因此,综合考虑测定灵敏度及吸光度的稳定性,选择显色剂中钛溶液加入量为510ml为宜(此处与文献报道 不同,文献报道钛溶液最佳加入量为710ml )。214　比色时间选择 在相同实验条件下,测量体系加一定量已知标准溶液和钛溶液,显色完毕后,立即测定,吸光度值为010975;于室温下放置30min后测定,吸光度值010998;室温下放置1h后测定,吸光度值为010995。为保证测定精确度,应在显色30min后测定,并在30min内测定完毕。215　精密度及回收率测定按推荐方法测定样品,各加标50μg,计算加标回收率。 对同一试样平行测定3次,计算相对标准偏差,结果见表2。表2　RSD%及加标回收率 样品号123样品测定值(μg ) 202160461741612RSD(×10-2) 112721831112加标测定值(μg ) 25118595197465193加标回收率(×10-2) 9815098154981613　小结 本文建立了通过钛溶液分光光度法测定食品中过氧化氢 的方法。通过试验探讨了测定的最佳试验条件,即采用410nm波长、在2510～500μg过氧化氢含量范围、510ml钛 显色剂用量、比色时间为30～60min。本方法准确可靠,重现性好,可作为食品中的过氧化氢测定方法。