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毛细管电泳分析DNA

wy20071722

2014/04/18

毛细管电泳（CE）

求教：我用毛细管电泳跑DNA，为什么随着时间的增加，DNA的响应却越来越小，重新冲洗毛细管没有用，做药物样品就不会这样。DNA怎么处理才能保证信号变化不会这么快？

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CEcret

第1楼2014/04/19

你用的是涂层毛细管么？如果不是，那么存在吸附效应的。。。

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nini2006

第2楼2014/04/19

管的问题，样品问题，条件稳定度的问题，要逐一排查

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wy20071722

第3楼2014/04/20

换过毛细管了，没有改善。样品是新买的。
nini2006(nini2006) 发表:管的问题，样品问题，条件稳定度的问题，要逐一排查

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wy20071722

第4楼2014/04/20

我用的是裸管，刚刚溶解的DNA相应很高，放一段时间就不行了。换了新管子也不行。
CEcret(v2812644) 发表:你用的是涂层毛细管么？如果不是，那么存在吸附效应的。。。

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CEcret

第5楼2014/04/22

这个正是吸附作用明显的表现。尝试采用：

1. 涂层毛细管

2. 动态涂层技术

3. 极端pH，例如pH>9。
wy20071722(wy20071722) 发表:我用的是裸管，刚刚溶解的DNA相应很高，放一段时间就不行了。换了新管子也不行。

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nini2006

第6楼2014/04/22

外部条件有变？温度、湿度等……
wy20071722(wy20071722) 发表:换过毛细管了，没有改善。样品是新买的。

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wy20071722

第7楼2014/04/22

这个就不清楚了。我现在认为是DNA本身的原因。做DNA的毛细管电泳可能需要对DNA进行处理保证稳定性。
nini2006(nini2006) 发表:外部条件有变？温度、湿度等……

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CEcret

第8楼2014/04/23

DNA样品，只要保持样品盘控温，稳定性还是可以满足分析要求的。个人认为最重要的因素在于你采用的非涂层裸管的吸附。
wy20071722(wy20071722) 发表:这个就不清楚了。我现在认为是DNA本身的原因。做DNA的毛细管电泳可能需要对DNA进行处理保证稳定性。

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wy20071722

第9楼2014/04/25

我特别不明白的是DNA不是带负电吗，管壁也带负电，为什么还有吸附？这不是和极端pH的道理一样吗？

我家仪器没有控温装备
CEcret(v2812644) 发表:DNA样品，只要保持样品盘控温，稳定性还是可以满足分析要求的。个人认为最重要的因素在于你采用的非涂层裸管的吸附。

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nini2006

第10楼2014/04/26

咦——你不是用的beckman的仪器吗？实在不行，保持空调常开，门窗紧闭，以控制温湿度。晚上停止实验的时候也不要关。
wy20071722(wy20071722) 发表:我特别不明白的是DNA不是带负电吗，管壁也带负电，为什么还有吸附？这不是和极端pH的道理一样吗？

我家仪器没有控温装备

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