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使用紫外分光光度计校准标准储备液

olafo

2014/05/16

紫外可见分光光度计（UV）

国标GB 5413.9-2010中针对维生素ADE标储标定方法，使用的是紫外分光光度计测量吸光值，而后再依据公式计算出实际浓度。我用的试剂空白是色谱纯的乙醇，溶解标准品的溶剂也是色谱纯乙醇，但是空白试机归零后，使用VE标准储备液(500ug/mL)50uL于3mL比色皿中，检测出的吸光值为负数。使用的是普析的紫外分光光度计，用的是石英比色皿，标准品是西格玛的。

江湖告急！忘五湖四海兄弟姐妹们伸出援手！

疑问：

1.试剂空白是否合适？大家是否是一样的操作？

2.为什么储备液的吸光值是负值？

3.标定后的浓度与理论一般差多少？相差较大的话以标定的为准还是理论为准？

分
该帖子已被版主-yqfxy加3积分，加2经验;加分理由:很好的问题请大家快快帮助楼主一下

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童话仙子

第1楼2014/05/16

如果出现负数，那么肯定不对

0

Jun Nan Li

第2楼2014/05/18

考虑一下仪器的调零状态。
储备液配比的方案

0

Jun Nan Li

第3楼2014/05/18

上学的时候曾经把比色皿的毛玻璃面对着透光处，当时自己还找原因为啥吸光值是负数。

0

烟雨江南

第4楼2014/05/18

应助达人

出现负数说明空白参比的吸光度比标准还要高，参比液是否与标准的溶剂一致？不一致易出现这种情况

0

qianguiyun1

第5楼2014/05/19

应助达人

调零时用的比色皿是多大的？

0

小虾米

第6楼2014/05/31

以标定的浓度为准

0

qianguiyun1

第7楼2014/06/14

应助达人

有可能2只比色皿误差比较大

0

小虾米

第8楼2014/06/19

3.标定后的浓度与理论一般差多少？相差较大的话以标定的为准还是理论为准

有示值误差可以计算的。

0

WUYUWUQIU

第9楼2014/06/20

应助达人

这种情况现在也有，都是不了解惹的祸
Jun Nan Li(yqfxy) 发表:上学的时候曾经把比色皿的毛玻璃面对着透光处，当时自己还找原因为啥吸光值是负数。

0

烟雨江南

第10楼2014/07/31

应助达人

储备液测定都出现负值说明方法处理过程还是有问题的

0

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