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[六月份原创]饲料中三聚氰胺测定

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  • 三聚氰胺,简称三胺,分子式C3N6H6,是一种重要的氮杂环有机化工原料。由于三

    聚氰胺分子中含有大量氮元素,而普通的全氮测定法测饲料和食品中的蛋白质含量时不能排

    除这类假蛋白氮的干扰,因而一些厂商为了能降低成本而添加这种化工原料,以提高产品中

    蛋白质含量。长期或反复大量摄入三聚氰胺可能对肾与膀胱产生影响,导致产生结石。奶粉中相继查出含大量的三聚氰胺,故测定饲料中是否含有三聚氰胺,具有重大意义。

    1材料和方法

    1.1 主要仪器和试剂

    岛津高效液相色谱仪LC-10Avp

    高速离心机(10000r/min)

    超声波震荡仪;

    涡旋混合器;

    分析天平(万分之一);

    溶剂过滤器(带0.45um有机、水系过滤膜和真空泵);

    乙腈(HPLC级);

    三聚氰胺(≥99.0%);

    三氯乙酸(优级纯);

    柠檬酸(分析纯);

    辛烷磺酸钠(色谱级);

    水(二次蒸馏水以上);

    2. 三聚氰胺提取

    称取2g(精确至0.01g)粉碎试样于50mL具塞塑料离心管中,加入15mL1%三氯乙酸和5mL乙腈,超声提取10min,再振荡提取10min后,以不低于4000r/min离心10min,上清液经三氯乙酸溶液润湿的滤纸过滤后,用三氯乙酸溶液定容至25mL,移取5mL滤液,加入5mL水,混匀后待净化液。

    3. 净化步骤净化
    SPE柱:月旭Welchrom® P-SCX固相萃取柱(60mg/3 mL;Part NO: WSS46180101
    a)活化:依次加入3mL甲醇、5mL水活化,流出液弃去;
    b)上样:将提取液加入月旭Welchrom® P-SCX柱中,流出液弃去;
    c)淋洗:依次用3mL水、3mL甲醇淋洗,淋洗液弃去;
    d)洗脱:用6mL 5%氨水-甲醇溶液洗脱,收集洗脱液;
    e)浓缩:用氮气或者水浴蒸发至干,残留物用1mL流动相定容,涡旋混合1min,过微孔滤膜后,供HPLC分析;注:整个固相萃取全过程采用的自然重力流速过柱,不需要加压也不需要抽真空。

    4. 色谱条件色谱柱:色谱柱:Welchrom-C18 ( 250 mm ×4.6 mm 5μ ); Serial Number:W13212257;
    流动相乙腈:10mM/L柠檬酸+10mM/L辛烷磺酸钠缓冲液=1090pH=3.0

    流速:1.0mL/min
    进样量:10μL
    柱温:40 ºC
    检测波长:240nm

    三聚氰胺标液色谱图


    工作曲线:



    样品测定数据:



    图3 某样品的色谱图

    加标回收率:



    结论:采用月旭Welchrom® P-SCX固相萃取净化柱(60mg/3 mL)及月旭Ultimate® XB-C8(4.6 x 250mm, 5μm)色谱柱测定饲料中的三聚氰胺,具有检测灵敏度高、精密度高、准确度高、线性范围好和回收率高等优点,完全符合分析要求,适合各类饲料中三聚氰胺的快速检测。

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  • 逆天一棍

    第1楼2014/06/03

    月旭的萃取柱,加上月旭的分析柱,这叫强强联合!

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  • wsy18

    第2楼2014/06/03

    还有啥能加的?

    逆天一棍(fengmo4668) 发表:月旭的萃取柱,加上月旭的分析柱,这叫强强联合!

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  • nphfm2009

    第3楼2014/06/03

    应助达人

    月旭好象还有一种固相萃取的装置

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  • 御风飘逝

    第4楼2014/06/03

    三聚氰胺,在中国知名度很高啊!

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  • xiaoxu

    第5楼2014/06/03

    饲料中还要添加三聚氰胺!

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  • 逆天一棍

    第6楼2014/06/03

    还可以选择月旭的色谱试剂。

    wsy18(wsy18) 发表:还有啥能加的?

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  • wsy18

    第7楼2014/06/03

    月旭的预柱?

    逆天一棍(fengmo4668) 发表:还可以选择月旭的色谱试剂。

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  • dahua1981

    第8楼2014/06/04

    应助达人

    对头

    逆天一棍(fengmo4668) 发表:月旭的萃取柱,加上月旭的分析柱,这叫强强联合!

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  • dahua1981

    第9楼2014/06/04

    应助达人

    你是指月旭的?

    wsy18(wsy18) 发表:还有啥能加的?

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  • dahua1981

    第10楼2014/06/04

    应助达人

    看来都是高手啊

    wsy18(wsy18) 发表:月旭的预柱?

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