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测定蛋白分子量

液质联用(LCMS)

  • 我想请问一下用ESI测定蛋白分子量是要用什么作为质量分析器呢?
    此外,测定蛋白分子量是用ESI好还是MALDI好呢?
    然后样品是脱盐以后直接进样就可以了吗?
    望解答。
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  • hujiangtao

    第1楼2014/06/29

    应助达人

    应该是MALDI好一些

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  • daoyuanli

    第2楼2014/07/01

    1.你的蛋白纯吗,纯度大概有多少?
    2.你的样品在什么缓冲液中?
    3.你的蛋白上有翻译后修饰吗?比如是否有糖基化位点,有几个?
    4.你想得到的结果允许的误差是多大?

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  • 八杯水

    第3楼2014/07/01

    你的蛋白分子量大概范围是多少啊?

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  • 八杯水

    第4楼2014/07/01

    我们这边分子量大的蛋白不是用质谱来测的。

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  • daoyuanli

    第5楼2014/07/02

    ESI源和MALDI源都可以做,各有优势。
    ESI源的质谱做的结果更加准确,但是数据处理比较复杂,需要对多电荷的质谱图进行去卷积处理才能得到分子量。
    MALDI源的质谱数据更加直观,但是误差会稍微大一点。

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  • xueliwu2000

    第6楼2014/07/08

    专业回答

    daoyuanli(daoyuanli) 发表:ESI源和MALDI源都可以做,各有优势。
    ESI源的质谱做的结果更加准确,但是数据处理比较复杂,需要对多电荷的质谱图进行去卷积处理才能得到分子量。
    MALDI源的质谱数据更加直观,但是误差会稍微大一点。

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  • sunsummer

    第7楼2014/07/17

    我们实验室常用ESI-TOF做蛋白质分子量测定,但ESI对于膜蛋白这样的溶解度极小的样品用Maldi-TOF更合适一些。高分辨质谱质量做的是否准确与校正有关系,ESI可实现多点校正,而Maldi-TOF通常只用某几个分子量相近的蛋白做标样,因此,ESI准确度通常要好一些。

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  • daoyuanli

    第8楼2014/07/20

    专家,学习了!

    sunsummer(sunsummer) 发表:我们实验室常用ESI-TOF做蛋白质分子量测定,但ESI对于膜蛋白这样的溶解度极小的样品用Maldi-TOF更合适一些。高分辨质谱质量做的是否准确与校正有关系,ESI可实现多点校正,而Maldi-TOF通常只用某几个分子量相近的蛋白做标样,因此,ESI准确度通常要好一些。

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