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温度液相色谱之利弊

houjjun

2014/07/26

温度液相色谱之利弊

液相色谱是一种高端的分析仪器及分析技术的总成，它的高灵敏度、高准确度、高分离分析效果与效率、高选择性、高应用范围等优良的特性造就了它必定会成为很多分析、检验行业的首选。

然而液相色谱虽然有很多优点，但作为一种高端的分析仪器与分析方法，它也是有一定的局限性和实验要求的，尤其是对实验环境和色谱条件要求较高。其中环境温度和系统温度对液相色谱的影响是很大的。

温度对高压泵的流速、系统压力、分离、洗脱效果、保留时间、定量计算、灵敏度、气泡的溶解度、基线漂移和基线噪声等重要指标都有不同程度的影响。

温度对高压泵流速有影响。温度的变化影响流动相的粘度，从而影响流速。一般来说温度越高流动相的粘度就越小，流速就会越大，气体正好相反。不过这个影响是很微软的，但对于高端的精密仪器，这种影响也是不能忽略的。流速的变化直接影响了样品分析的保留时间，同时也影响了分析的结果。另外温度还对流动相中气泡的溶解度也有影响，一般来说在一定范围内温度过高或过低，流动相中气泡的溶解度都是偏高的。流动相中气泡含量高，一是影响高压泵的流速；二是影响分离、分析效果；三是影响仪器的故障率和性能，如对色谱柱、单向阀、流通池等部件都有一定的影响；另外系统进入气泡，有时排气泡也是比较麻烦的。显然不理想的温度或温度变化对高压泵的流速及分析结果、仪器状况等影响是比较大的，那么对于起着输液作用的高压泵及流动相的温度控制是很重要也是很必要的。

温度对进样量的影响。温度变化样品的的密度就有变化，那么进同样体积的样品，样品的进样量是不一样的。另外温度变化，样品中含的气泡量也不一样，这样也同样会影响仪器的很多性能和分析结果的很多数据。所以对进样系统控温是很重要也是很必要的。

温度对样品分离、洗脱的影响。温度越高色谱柱填料的活性就会越高（前提是在允许范围内。温度太高色谱柱填料会被破坏，色谱柱长期在高温下运行，寿命也会缩短，所以柱温一定得控制在合理的范围内），同一流动相同一色谱柱对同一样品的洗脱能力就会越强，样品的保留时间就会越短。但样品的保留时间短了，混合样品的分离度就会降低，从而影响分析结果。温度控制或温度变化对分离、洗脱既有利又有弊，所以对分离系统选择合适的温度并控温是很重要也是很必要的。

温度对检测的影响。温度对很多检测器的影响都是很明显的，一般温度升高，检测器的灵敏度会升高，温度降低检测器的灵敏度会降低。这个温度有的是环境温度带来的，有的是检测器或相邻仪器发热部件产生的，其中检测器灯源发热带来的影响一般来说是比较大的。其中示差检测器对温度变化的感应是非常大的，所以对检测池控温尤其是示差检测器的检测池是非常重要也是非常必要的。

温度的变化会带来基线的波动，基线的漂移，基线噪声的不稳定，检测结果的不重现不准确，有时还会有一定的规律性。其中空调、马弗炉等影响环境温度的设备如果使用时不远离液相色谱检测器，就会对检测器产生较大影响，直接导致检测结果不准确。所以对检测池的控温，对影响检测池环境温度的设备的控制是很重要也是很必要的。

为了提高检测灵敏度有时我们会适当升高温度，但前提一定是稳定的温度。但提高温度很多时候仪器的不稳定因素也会增加，比如基线漂移、噪声增大等。温度高了仪器灵敏度高，温度低了仪器稳定性好，所以我们一是要选择适当、合理的检测池温度；二是如果要追求灵敏度指标，我们可以适当升温，追求稳定性指标，我们可以适当降温。

对检测池控温，包括检测池主体控温和检测池连接管路控温。

下面我们以图说话，看看不同温度下分析的效果：

色谱柱温度不同，分析效果

进样器温度不同，进样效果

温度变化色谱图对比

检测池温度不同，噪声对比

检测池温度不同，漂移对比

另外温度高了、低了或变化比较大时会影响仪器内部很多部件的寿命和性能，所以我们对某些关键部件或受温度影响明显的部件采取适当的通风、散热、保温、隔热、加热、制冷等控温措施是非常重要也是非常必要的。

当然仪器（尤其是高效液相色谱仪）全系统控温是最好的，包括高压泵，进样器、混合器、色谱柱、检测池等。这样流速、混合、分离、定性分析、定量分析等重要指标都会大大提升。尤其对我们最关心的分析结果效果更为明显。

温度对液相色谱的影响很大，控温很重要也很必要，控温对液相色谱及分析结果意义非凡。

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三人行

第1楼2014/07/27

温度恒定很重要。

0

houjjun

第2楼2014/07/27

如果对结果要求较高，温度还是尽量恒定
三人行(jncxyy2012) 发表:温度恒定很重眼。

0

zdac

第3楼2014/07/28

高端仪器，恒温很重要。很好，

0

wsy18

第4楼2014/07/28

楼主在文章的第四段中说温度越高流动相的粘度就越大，流速就会越小。我怎么感觉是相反呢？

1

wsy18

第5楼2014/07/28

第六段中说到温度对色谱柱填料的影响：温度越高色谱柱填料的活性就会越高，
我觉得对于色谱柱填料来说，超过一定温度就会分解破坏。
所以并不是温度越高色谱柱的填料活性就会越高，对样品的洗脱能力就会越强。

0

dahua1981

第6楼2014/07/28

应助达人

现在液相一般都有恒温室啊

0

御风飘逝

第7楼2014/07/28

还以为出了一种新液相色谱叫温度液相色谱呢！

0

御风飘逝

第8楼2014/07/28

为了保证结果的一致性，一般都要求同一条件下做样的。有明显的温度变化，肯定是不符合要求的。

0

bingwang228

第9楼2014/07/28

应助达人

温度变化，保留时间可能会漂移，而且温度肯定不是越高越好，长期在高温下实验，会损坏色谱柱的

0

houjjun

第10楼2014/07/28

好像是这样吧
wsy18(wsy18) 发表:楼主在文章的第四段中说温度越高流动相的粘度就越大，流速就会越小。我怎么感觉是相反呢？

0

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