打UPLC的时候峰分叉是什么原因？

应助达人

第一针的峰型如何，有没有拖尾或者展宽之类的，第一针的进样量有没有过载？

进样量是10ul，应该不会过载，过载那应该是平头峰而不是分叉吧。

UPLC是1.7um的那种柱子根本就不用打10ul那么多，除非你做有关物质那些需要过载的实验

UPLC你们一般进样量是多少啊？

是单标的话 可能是柱效下降了

样品过载、溶剂和流动相不匹配、色谱柱损坏、预柱和保护住的影响、柱塞污染等都可能出现峰分叉的可能的，从这些方面分析排除吧。

应助达人

首先查找一下原因，流动相和色谱柱都排除之后，那就是样品的处理方面了，如果是不同样品，第一针不分叉，第二针分叉，那就把第一针重复进3针，看后2针是否分叉；
如果是同一样品，看样品的前处理是否相同，一般溶剂的极性不要超过流动相，否则，色谱峰是有可能分叉的。

进样量1UL就够了 ，换跟色谱柱试试 一般是色谱柱的问题

如果峰一直分叉，那有一般是柱子的问题了，换个保护柱或者直接换根新柱子试试。
如果偶然的情况，可能是样品杂质残留在柱子里，在下一针的时候才冲出来。调一下方法，每个样品做完后大比例有机相的梯度冲洗下柱子试试。