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地沟油中黄曲霉毒素和苯并芘的检测

vcningmeng

2014/09/10

地沟油中黄曲霉毒素和苯并芘的检测

近几年来，地沟油事件频频爆发，严重危害人们的身心安全。2014年9月，正值中秋佳节，台湾台湾地沟油事件震惊两岸。

“地沟油”是一种质量极差、极不卫生的非食用油。一旦食用“地沟油”，它会破坏人们的白血球和消化道黏膜，引起食物中毒，甚至致癌的严重后果。

目前没有特定科学方法检测和鉴别用“地沟油”制造的食用油。国际上一般会检测如苯并（a）芘、黄曲霉毒素和金属杂质等含量，香港食安中心和台湾当局均采取同类检测方法。

上海安谱一直致力于食品安全检测，特推出地沟油中黄曲霉毒素和苯并芘的检测整体方案。

一．油中黄曲霉毒素的检测

1.1.样品前处理

l 称取25g样品及2.5g氯化钠并转移到干净的三角瓶中。

l 加50ml 80%甲醇/水溶液。

l 漩涡混合震荡1mim，4000r/min 离心6min。

l 取甲醇/水溶液至少10ml。

l 取5ml萃取液加入20ml水，彻底混合。

l 用玻璃纤维滤纸过滤至澄清，取10ml加入到免疫亲和柱（SBHL-20-0383）中。

1.2 使用免疫亲和柱纯化

1.2.1 检测前的准备

1. 将所需的免疫亲和柱在使用前回温至室温（20-25℃）。

2. 免疫亲和柱的上下端有塑料塞子，在使用时可以取下。

3. 在使用的过程中避免免疫亲和柱的干燥。例外情况为1.2.2.中第4步（洗脱前短暂的排空）和5步（洗脱后的完全排空）。

4. 过高的压力或真空提取设备产生的负压会压紧凝胶而导致回收率降低。

1.2.2 检测操作

1. 将10ml注射器连接于免疫亲和柱上端。

2. 处理好的样品液以1-2滴/秒的速度通过亲合柱，弃掉流出的液体。

3. 以10ml水淋洗柱子两次，弃掉流出的液体。

4. 利用真空设备压入空气（约10秒），确保所排除所有的液体。

5. 用1ml甲醇缓慢洗脱（流速约为2-3秒每滴），残留的洗脱液使用空气压出或真空抽出（30秒）并将洗脱液收集于干净的比色皿或其他容器中用于检测。

1.3 液相色谱法

色谱柱：Athena C18-WP 液相色谱柱 4.6*150mm，5um

流动相：45%甲醇/水

流速：0.8 mL/min

柱温：30℃

进样量20ul

检测器：荧光检测器

激发波长：360nm

发射波长：440nm

AURA 光化学衍生器

1.4 实验谱图

回收率：80-110%

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vcningmeng

第1楼2014/09/10

一．油中苯并芘的检测

2.1样品前处理

称取0.5g油样，加入3mL正己烷涡旋混合震荡溶解10s，待净化。
SPE操作过程：
（1）活化：依次用5ml二氯甲烷，5mL正己烷活化小柱(SBEQ-CA4854，MIP-BAP苯并芘小柱)
（2）上样：将待净化液上样到小柱上，然后再用2mL正己烷润洗样品瓶，然后也上样到柱上。
（3）淋洗：用10ml正己烷淋洗小柱
（4）洗脱：5ml二氯甲烷，并收集
（5）浓缩定容：将收集液在40℃下氮气吹干，用1mL乙腈定容，超声1min，再漩涡混合10s,过0.22um亲水PTFE针式滤器(SCAA-114)，待上机检测；

2.2．液相色谱法

色谱条件：

色谱柱：Athena C18-WP 液相色谱柱 4.6*150mm，5um
流动相：乙腈：水(95:5，v/ v)
流速：1.0mL/min；
荧光检测器：激发波长384nm，发射波长406nm
柱温：35℃
进样量：20µL；

2.3．实验谱图

0

999youran

第2楼2014/09/10

检测起来耗材不便宜啊

0

dahua1981

第3楼2014/09/11

应助达人

说明检测费会高一些
999youran(999youran) 发表:检测起来耗材不便宜啊

0

vcningmeng

第4楼2014/09/11

相对来说，做免疫亲和的柱子价格会贵一些。
999youran(999youran) 发表:检测起来耗材不便宜啊

0

vcningmeng

第5楼2014/09/11

地沟油，大家都不做吗？

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千层峰

第6楼2014/09/11

黄曲霉素检测成本较高。
苯并芘评估普通地沟油，还是有点道理的。。

0

xiaoxu

第7楼2014/09/12

比一般的C18柱要贵啊
vcningmeng(vcningmeng) 发表:相对来说，做免疫亲和的柱子价格会贵一些。

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xiaoxu

第8楼2014/09/12

苯并芘的来源是？
千层峰(jxyan) 发表:黄曲霉素检测成本较高。
苯并芘评估普通地沟油，还是有点道理的。。

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千层峰

第9楼2014/09/12

那个油脂在高温下，有可能产生苯并芘。。。
xiaoxu(xufangdan) 发表:苯并芘的来源是？

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arcueid5768

第10楼2014/09/12

不过，就算检测不出黄曲霉或者苯并芘也不能说明这个不是地沟油吧

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