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样品进样浓度如何确定?

化学药检测

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  • 我目前正在进行一个项目的方法开发和标准制订,液相的方法已经开发完成,目前有个问题不明白,需要向各位大侠请教。这是个对映体方法的检测,根据信噪比,大约计算出检测限浓度为0.1ug/ml,对映体的限度为主成分的0.01,主成分准备进个0.01自身对照。供试品溶液浓度应该配成多少比较合适,对映体检查比较合理。
    百分号既然是非法字符,只能用0.01代替了。
    另外,进样量10ul,20ul,是如何定的,有没有什么标准,还是随便定的?

浪淘沙隐 2014/09/30

这个好算。你的LOQ是0.1ug/ml,除以限度0.01%,就是10mg/ml,这个浓度相当大了。不过以上均基于你目前的方法(包括进样量),并且认为异构体和主产物的响应相同来计算的。如果你目前的进样量为5ul,如果改为20ul的话,样品浓度可以降为2.5mg/ml。 实际上,为了保证分析方法的可靠性,一般会要求限度峰面积比定量限峰面积大几倍,也就是说这个样品浓度还得更高。楼主这个方法不太好,可以考虑换个响应更高的波长,或者减少流动相的吸收,或者增加采样频率等方式来提高响应。

  • 该帖子已被版主-云雀加2积分,加2经验;加分理由:发帖奖励
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  • 青林

    第1楼2014/09/29

    这个好像是没有规定的,应该是和你的样品浓度有关。

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  • 云雀

    第2楼2014/09/29

    液相有个定量环,定量环有最佳定量体积,在这个范围内应该都是合格的

    太极鱼(huangdong413) 发表:我目前正在进行一个项目的方法开发和标准制订,液相的方法已经开发完成,目前有个问题不明白,需要向各位大侠请教。这是个对映体方法的检测,根据信噪比,大约计算出检测限浓度为0.1ug/ml,对映体的限度为主成分的0.01,主成分准备进个0.01自身对照。供试品溶液浓度应该配成多少比较合适,对映体检查比较合理。
    百分号既然是非法字符,只能用0.01代替了。
    另外,进样量10ul,20ul,是如何定的,有没有什么标准,还是随便定的?

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  • 浪淘沙隐

    第3楼2014/09/30

    这个好算。你的LOQ是0.1ug/ml,除以限度0.01%,就是10mg/ml,这个浓度相当大了。不过以上均基于你目前的方法(包括进样量),并且认为异构体和主产物的响应相同来计算的。如果你目前的进样量为5ul,如果改为20ul的话,样品浓度可以降为2.5mg/ml。
    实际上,为了保证分析方法的可靠性,一般会要求限度峰面积比定量限峰面积大几倍,也就是说这个样品浓度还得更高。楼主这个方法不太好,可以考虑换个响应更高的波长,或者减少流动相的吸收,或者增加采样频率等方式来提高响应。

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  • 太极鱼

    第4楼2014/09/30

    多谢浪淘沙隐(zhoujin83) 的回帖,按照你的计算方法,检测限0.1ug/ml,除以限度0.5%,就是0.02mg/ml,这个浓度是不是太小了。我准备定样品浓度为1mg/ml,1%自身对照就是10ug/ml,限度为0.5%时,对映体浓度为5ug/ml,是检测限浓度的50倍,不知这样是否合理。

    另外,你说我的方法响应不高,是不是指检测限浓度太高了,由于这是用正相走的,峰形没有反相好看,拖尾也有点严重,峰宽大约0.5min,所以检测限就要大点。波长是最大吸收波长260nm。

    浪淘沙隐(zhoujin83) 发表:这个好算。你的LOQ是0.1ug/ml,除以限度0.01%,就是10mg/ml,这个浓度相当大了。不过以上均基于你目前的方法(包括进样量),并且认为异构体和主产物的响应相同来计算的。如果你目前的进样量为5ul,如果改为20ul的话,样品浓度可以降为2.5mg/ml。

    实际上,为了保证分析方法的可靠性,一般会要求限度峰面积比定量限峰面积大几倍,也就是说这个样品浓度还得更高。楼主这个方法不太好,可以考虑换个响应更高的波长,或者减少流动相的吸收,或者增加采样频率等方式来提高响应。

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  • 浪淘沙隐

    第5楼2014/09/30

    我回帖中已经提到了,实际分析时,限度浓度峰的响应是要比定量限响应高一些的,你提到的例子,1mg/ml的样品浓度很合适。

    至于方法好不好,是相对来说的。因为之前的例子,限度为0.01%,实在太小了。

    太极鱼(huangdong413) 发表:多谢浪淘沙隐(zhoujin83) 的回帖,按照你的计算方法,检测限0.1ug/ml,除以限度0.5%,就是0.02mg/ml,这个浓度是不是太小了。我准备定样品浓度为1mg/ml,1%自身对照就是10ug/ml,限度为0.5%时,对映体浓度为5ug/ml,是检测限浓度的50倍,不知这样是否合理。

    另外,你说我的方法响应不高,是不是指检测限浓度太高了,由于这是用正相走的,峰形没有反相好看,拖尾也有点严重,峰宽大约0.5min,所以检测限就要大点。波长是最大吸收波长260nm。

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  • erge

    第7楼2014/10/10

    增加采样频率可以提高相应?

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  • 浪淘沙隐

    第8楼2014/10/11

    有些时候能少量提高。

    erge(lihouquan) 发表:增加采样频率可以提高相应?

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  • 影子

    第10楼2014/10/27

    不会吧?你不是这方面的专家么,应该多给点经验才是

    一道黑(qingwenh) 发表:学习一下!

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