云中漫步
第4楼2006/09/18
实验六 水样中苯酚含量的紫外光谱定量法
一、原理
紫外光谱法是用紫外分光光度法测定试样中某一组分的含量,与一般比色分析相同。
将待测液的纯品,配成一系列标准溶液,事先绘制紫外吸收曲线,找出λmax , 然后在这波长下测试一系列不同浓度的标准溶液吸光度。
以吸光度作纵坐标,浓度作横坐标,绘出工作曲线。将待测未知样品的吸光度对照工作曲线,找出含量。测定水中酚的含量,是水质分析常用方法之一。
苯酚加入氢氧化钠溶液后,羟基上的氢全部电离,氧原子与苯环的共轭作用加强,引起吸收峰的红移,吸收强度加大,可提高测定灵敏度。
P14《波谱分析法》分子离子化的影响:
苯胺在酸性介质中会形成苯胺盐阳离子,苯胺形成盐后,氮原子的未成键电子消失,氨基的助色作用也随之消失,因此苯胺盐的吸收带也从230nm和280nm蓝移到203nm和254nm。
苯酚在碱性介质中能形成苯酚阴离子,其吸收带将从210nm和270nm红移到235nm和287nm,苯酚分子中OH基团含有两对孤对电子,与苯环上π电子形成n→π共轭,当形成酚盐阴离子时,氧原子上孤对电子增加到三对,使n→π共轭作用进一步加强,从而导致吸收带红移,同时吸收强度也有所加强。
二、仪器与试剂
UV—1100型分光光度计;容量瓶(50毫升,10毫升,250毫升各一只);移液管。
储备液(准确称取新蒸馏的苯酚约250毫克,放入250毫升的棕色容量瓶中,用无酚水稀释至刻度,放入冰箱保存),1 mg / mL
0.1 N 氢氧化钠溶液。
使用液,吸取储备液5.0毫升放入50毫升容量瓶中,用无酚水稀释至刻度(当天新配)。
标准溶液,用移液管准确吸取0.5,1.0,2.0,3.0,4.0,5.0毫升使用液,分别置于10毫升容量瓶中,用0.1 N 氢氧化钠溶液稀释至刻度。
无酚水,取一根直径6~7厘米,长100厘米的层析柱,装置20~40目的层析纯活性炭,控制适当流速,用蒸馏水制备无酚水。
三、实验步骤
(1)仔细阅读UV—1100 型分光光度计的使用说明书,掌握仪器的使用方法。
(2)记录吸收曲线:
以无酚水作参比,记录苯酚水溶液的吸收曲线。
以无酚水作参比,记录苯酚水溶液的吸收曲线。
以0.1N氢氧化钠作参比,记录苯酚钠溶液的吸收曲线。
(3)从吸收曲线上选定测定波长,按仪器说明书调零。
(4)样品室依次换上标准溶液和未知样品。每换一次,记录下相应的吸光值。
苯酚加入氢氧化钠溶液后,羟基上的氢全部电离,氧原子与苯环的共轭作用加强,引起吸收峰的红移,吸收强度加大,可提高测定灵敏度。
四、结果处理
(1)以吸光度A对浓度c作图,用标准溶液测定结果,绘制工作曲线。
c
0.50
1.00
2.00
3.00
4.00
5.00
A
0.157
0.284
0.502
0.748
1.139
1.375
(2)从工作曲线上查出未知样品中苯酚含量。