何首乌高效液相色谱检测法
何首乌（Polygortum muLti florum Thunb）为蓼科植物，干燥块根为药物成分。大小不同，形状各异，有的有十几斤重，很多具有明显的动物形状，甚至具有人的外貌特征，具有很高的药物灵性。
说起何首乌，我们不难想起鲁迅先生的《从百草园到三味书屋》的历史佳作。在这篇大作中鲁迅先生也多次描述过何首乌，可见何首乌留给鲁迅先生的印象也不一般。
何首乌为滋补性中药，具有消痈、解毒、腹泻、补肝肾、益精血、壮筋骨、润肠通便、抗衰老等功效。常用于治疗疮痈、疮痈、瘰疬、风疹、瘙痒、久疟体虚、肠燥便秘等病症。《开宝本草》中甚至高称：首乌“止心痛，益血气，黑髭发，悦颜色，久服长筋骨，益精髓，延年不老”。近代研究多次证明，何首乌还具有降低血脂、减缓心率、增强机体抗寒能力、促进红细胞生成等奇效。
何首乌中药物成分只要是蒽醌类物质，称为总蒽醌。总蒽醌为游离蒽醌、结合蒽醌、蒽酮、糖、鞣质等物质的混合物。其中游离蒽醌、结合蒽醌中包含有大黄素（1,3,8-三羟基-6-甲基蒽醌，Emodin）、大黄素甲醚（1,8-二羟基-3-甲氧基-6-甲基蒽醌，Physcion）等药物成分。
下面我们就介绍下高效液相色谱检测何首乌中药物成分大黄素、大黄素甲醚含量方法。
实验部分
样品制备
对照品溶液的制备：精密称取大黄素对照品、大黄素甲醚对照品2mg、1mg，加甲醇分别配制成80μg/ml大黄素对照品溶液和40μg/m大黄素甲醚对照品溶液，备用。
供试品溶液的制备：取何首乌干燥根块适量，粉碎后过四号筛（药典筛）。精密称取过筛粉末1g，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，加热回流1小时，取出，放冷，再次称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过。精密量取滤液5ml作为供试品溶液A（测游离蒽醌用）。另精密量取滤液25ml，置具塞锥形瓶中，水浴蒸干，精密加8%盐酸溶液20ml，超声处理10分钟，加三氯甲烷20ml，水浴中加热回流1小时，取出，立即冷却，置分液漏斗中，用少量三氯甲烷洗涤容器，洗液并入分液漏斗中，分取三氯甲烷液，酸液再用三氯甲烷振摇提取3次，每次15ml，合并三氯甲烷液，水浴蒸干，加甲醇溶解，后转移至10ml容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，作为供试品溶液B（测总蒽醌用）。
色谱条件
检测器：紫外检测器
色谱柱：pGrandsil-STC C18，4.6 X 250mm，5um色谱柱
检测波长：254nm
流动相：甲醇：0.l%磷酸溶液=80：20（V：V）
甲醇：0.l%磷酸溶液=85：15（V：V）
流速：1.0ml/min
柱温：30℃
进样量：10μl
对照品色谱图：
供试品（1）A色谱图：
供试品（1）B色谱图：
供试品（2）A色谱图：
供试品（2）B色谱图：
从以上色谱图我们可以看出供试品B色谱图两种被测物峰面积（从峰高就可看出）明显大于供试品A，这就说明药材在制药过程中经过泡制、发酵等过程中，有一部分药物成分会损失掉，换句话说就是没被完全提取，没被完全利用。这个在制药工艺上一定得控制。
另外有时做样时，我们可以根据样品情况，适当优化色谱条件，分离度差的我们想想提高分离度的方法，一般就是换色谱柱，调整流动相，调整色谱柱温度，调整流速等。检测时间长的，我们想想缩短检测时间的方法，一般也是换色谱柱（可以换更短的色谱柱），调整流动相，调整色谱柱温度，调整流速等，只是和提高分离度的方法相反。峰形差的我们想想调整峰形的方法，一般也换色谱柱，调整流动相，调整色谱柱温度，调整流速，减小进样量，降低样品浓度等。
样品是不变的，方法是万变的，不同的方法，结果可能相似也可能相差甚远。只要有目标我们就可能会接近或实现。为了我们工作顺利，为了实现我们实验目标，为了一切的一切，我们共同努力，一起探讨，加油！
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