lingyou
第4楼2015/03/04
我看beckman的IgG Purity Heterogeneity Assay_B25801AA要求里,样品浓度低于10mg/ml和buffer浓度超过50mM时需要脱盐,我不确定buffer浓度,但是样品浓度肯定低于10mg/ml,所以为了保险每次都是脱盐的,然后复溶于sample buffer。
如果不需要脱盐,为什么样品处理的时候要求加入100ug体积必须小于45ul,然后加sample buffer到95ul?
lingyou
第7楼2015/03/04
那他要求的终浓度是1mg/ml.为什么要限定样品体积呢?如果我保证终浓度是1mg/ml,是不是可以加体积超过45μL,如果不可以,为什么?
zyma_100
第10楼2015/03/05
比例的话我觉得只要在范围内对检测结果影响不大
至于脱盐后复溶,要取决你脱盐的方式,是用离心浓缩管脱盐吗?我看你上面提到脱盐后没有测定蛋白浓度,测定时候发现峰面积变小,我认为还是经过脱盐处理后蛋白有损失造成的,你可以脱盐后复溶于水,然后测定浓度比较一下脱盐前后有无差别。