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各位高手求助,关于鱼肉中孔雀石绿与结晶紫的测定的问题,急急急

  • 小小的篮子
    2015/04/12
  • 私聊

液质联用(LCMS)

  • 最近在做一批样品中孔雀石绿及结晶紫的测定,方法是19857中液质的方法,出现了很奇怪的结果,第一次测定时,采用的外标法,我做了样品的前处理,另一个老师配置了标品和做上机处理,测了四个样品,每一个都检出了结晶紫,峰高都在几万,标品是50ppb,其中3号样品的结果还高出了标品的1点几倍,4.0e5,并且结果的重现性很差,做的双样。
    昨天我们又重新将四个样品进行前处理,采用了加内标的方法,结果四个样品中的结晶紫的信号都变低了都在检出限一下,峰高只有三四千左右,但是结果的重现性还是不好。于是我拿出了第一次测得3号样品定容后的剩下的,又重新净化上机,结果和第一次的也不一样了,信号也在3000多,但是拿出第一次做的放在进样瓶中的3号样同样的条件上机,结果还是4.0e5,很崩溃。不知道是哪一步出了问题。
    同时3号样品中还检测出了隐形孔雀石绿,但几乎每一个处理的隐形孔雀石绿结果都稳定。
    第一次处理中我并没有碰过标品,但是结果中结晶紫的特征峰都有并且很高,第二次特征峰中的小峰不明显并且信号很低,是什么污染了吗?
    第一次处理的3号样品瓶中的结果,和我将第一次处理的3号样品剩下的重新净化上机结果又不一样了,是因为剩下的样品暴露在光照下分解了吗?
    快要崩溃了,各位大神帮帮忙,明天准备要重新做了。
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  • hujiangtao

    第1楼2015/04/13

    应助达人

    孔雀石绿确实需要避光

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  • 小小的篮子

    第2楼2015/04/13

    好的,谢谢,除了避光还有什么需要注意的吗,比如哪些步骤容易污染?

    原文由hujiangtao发表: 孔雀石绿确实需要避光

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  • sbozzy

    第3楼2015/04/13

    标准品的配制过程是否防止交叉污染,另外黑色、蓝色记号笔对结晶紫都会有干扰

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  • 小小的篮子

    第4楼2015/04/13

    第一次我并没有配置标准品,是一个老师配置的,但是用的离心管确实是用黑色记号笔标记的,但是前一次用完都会清洗干净,是怎么造成的污染呢,第一次测定的结果确实是结晶紫含量超标

    sbozzy(sbozzy) 发表:标准品的配制过程是否防止交叉污染,另外黑色、蓝色记号笔对结晶紫都会有干扰

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  • 忏悔录

    第5楼2015/04/14

    首先孔雀石绿特别容易残留,所以建议进完标样后建议进1针纯有机相以后再进样品。我们实验室经常出现路径残留于污染的事情,冲洗特别费劲。
    第二,孔雀石绿很不稳定,有色无色总是相互之间转化,所以建议避光处理,及时进样。
    第三,你说的不稳定的现象,先排查仪器是否出现问题。例如,喷针是否堵塞,管路是否有堵住,或者有漏液,这些都可能导致信号不稳定。建议检测别的你们经常测定的指标先确定仪器是否有故障。这样以免做无用功,毕竟前处理很需要时间。
    还有一点,确认标准品没有问题。我们实验室最近就被标准品害惨了!找遍了原因,最后是采购的标准品的问题。
    希望可以帮到你,谢谢

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  • lily080908

    第7楼2015/04/14

    是按鲜活水产品做得还是按加工水产品做得前处理?我按加工水产做得值比鲜活的高

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  • 小小的篮子

    第8楼2015/04/14

    是按鲜活的,鲜活的前处理只加了乙腈,是不是太简单了,所以提取效果不好,也容易氧化导致结果不好?但是我们做的就是鲜鱼肉水产类的,可以按加工做吗,你有具体的改进方案吗?

    lily080908(lily080908) 发表:是按鲜活水产品做得还是按加工水产品做得前处理?我按加工水产做得值比鲜活的高

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  • 小小的篮子

    第9楼2015/04/14

    好的,谢谢你,基本上这个仪器做别的项目都很稳定,我们是一次用液质方法做,以前用的液相,机子的故障可以排除,但是可能是因为没有经验导致了污染吧,后来又冲了很多次机子。同时标品应该没有问题,只进标品还是比较稳定的。前处理是确实没有避光,最后一次我避光了,不过发现加了内标后,平行样之间显性的重现性比较差,有的结果是一个在天上一个地下的,但隐性的结果还比较稳定,偏差不是很大,不知道原因是什么····

    忏悔录(v2857354) 发表:首先孔雀石绿特别容易残留,所以建议进完标样后建议进1针纯有机相以后再进样品。我们实验室经常出现路径残留于污染的事情,冲洗特别费劲。
    第二,孔雀石绿很不稳定,有色无色总是相互之间转化,所以建议避光处理,及时进样。
    第三,你说的不稳定的现象,先排查仪器是否出现问题。例如,喷针是否堵塞,管路是否有堵住,或者有漏液,这些都可能导致信号不稳定。建议检测别的你们经常测定的指标先确定仪器是否有故障。这样以免做无用功,毕竟前处理很需要时间。
    还有一点,确认标准品没有问题。我们实验室最近就被标准品害惨了!找遍了原因,最后是采购的标准品的问题。
    希望可以帮到你,谢谢

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