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单糖分析的水解方法

离子色谱（IC）

  • 最近在做糖蛋白的单糖分析，检测前要用盐酸和三氟乙酸水解，然后离心浓缩仪除去溶剂。现有的离心浓缩仪不耐强酸，所以除溶剂步骤采用的是加热挥发法。做了两次发现，样品中都检测不到单糖峰，怀疑是不是加热时间长单糖焦化了呢？
    不知道有没有人做相关的实验，是不是有别的办法水解单糖呢？或者水解完毕后有别的办法来处理样品，像加碱中和之类的。
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  • 老多_小多

    第1楼2015/04/28

    加热挥发估计已经被酸分解掉了

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  • lingyou

    第2楼2015/04/28

    是吗？会分解的一点不剩啊？那是不是水解完了用碱中和再挥干比较靠谱呢

    老多_小多(emoc98311) 发表:加热挥发估计已经被酸分解掉了

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  • 老多_小多

    第3楼2015/04/28

    要看你的酸浓度，浓度大肯定会破坏掉，你可以试一试中和后

    lingyou(v2983592) 发表: 是吗？会分解的一点不剩啊？那是不是水解完了用碱中和再挥干比较靠谱呢

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  • lingyou

    第4楼2015/04/29

    看来只能这么试一试了

    老多_小多(emoc98311) 发表: 要看你的酸浓度，浓度大肯定会破坏掉，你可以试一试中和后

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  • peng_friend

    第5楼2015/05/06

    量不大，可以用氮气吹干

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  • lingyou

    第6楼2015/05/08

    米有这设备啊

    peng_friend(peng_friend) 发表:量不大，可以用氮气吹干

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  • bioengine

    第7楼2015/05/09

    水解过程一定要在密闭环境加温进行，一般2M的酸120度水解两个小时差不多可以。
    加热挥发就是水解过程的继续，而且是在有氧环境，不可行的。
    如果预期样品浓度比较高的，可以用碱来中和稀释后进样。如果浓度很低，则不可行，还是要减压蒸馏浓缩。

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  • lingyou

    第8楼2015/05/11

    您的意思是碱中和后再加热挥发都不行吗？

    bioengine(v2946422) 发表:水解过程一定要在密闭环境加温进行，一般2M的酸120度水解两个小时差不多可以。
    加热挥发就是水解过程的继续，而且是在有氧环境，不可行的。
    如果预期样品浓度比较高的，可以用碱来中和稀释后进样。如果浓度很低，则不可行，还是要减压蒸馏浓缩。

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