关于使用HPLC测定杂质大小的问题

像这种误差可以忽略不计吧

不过很奇怪的问题就是流速相差太大了？只要是同厂家同型号的色谱柱，流动相配制没问题，保留时间基本一致

其实我们也感觉结果这样的误差是可以忽略的，但是日本客户要求比较严谨，要求把质量标准收紧。
杂质大小初步感觉跟色谱柱有关，客户考虑是色谱柱老化的原因，之后我们采用同一个流动相不同仪器不同色谱柱进行了实验，相同流动相在使用不同色谱柱检测时主峰保留时间不同，所以为满足要求，将两个流速分别调整为2.78ml/min和3.16ml/min，检测结果分别为0.0048%和0.0060%。（前者色谱柱用的时间太久了，查看色谱柱档案发现首次使用是2010年，后者色谱柱是最近刚确认的）。所以客户提供了外标法跟LC-MS检测杂质的方法。

对这些要求调流速的方法，我都是不以为然。

请问一下这个方法的重复性和重现性分别是多少？

其实你的误差大小可不可以接受要看你液相方法对于该杂质的检出限。打个比方如果检出限在1ppm，你这个误差就算相当大了。建议你对于不同的柱子各走一套标曲，并且在走标曲和样品时使用一样的方法（包括相同的流速）再试一试。