[求助]关于串联凝胶色谱柱顺序问题。

我们刚开始使用时，也遇到同样的问题。了解过相关的使用方式和有经验的人士，大都认为连接顺序一般是从大分子量到小分子量。
后来和一些仪器维修工程师讨论过，也没有得到一个肯定结论。所以我认为从小到大接也不是不行，只要柱子的方向没错就可以。具体对分析结果的影响就更小了，主要是由标准曲线，结果一般没有太大差别。
有一点值得说的就是柱子的方向问题，一般使用是按照柱子的标志方向来用，是因为柱子在制作时是按照一定的方向在一定的压力下装填的。所以要按照指定的方向使用，但这并不说明就不能反接，有时柱子脏了还要反接冲洗呢。当然就要在较低的流速和压力下冲洗，是为了保证不要把柱子里的填料冲送动了。
一家之言，仅供参考。

从现象上看问题不大，但凝胶色谱的理论是建立在分离的基础上，也就是分子量从大到小的分子主义分离的，柱子的填料也是如此，分离都不同的柱子压力不同，使用错误会使柱子失效

我们曾经从小到大使用了一段时间好像与从大到小联接没有压力差别。
至于柱子失效，我想应该是用错误的柱子分析了错误的物质引起的吧，和柱子的连接顺序有关吗？

我们的产品分子量大概在23000左右，但药典要求10%大分子部分和10%小分子部分，分别是160000和4800，于是用的是这三根柱的串联。


是什么意思？10%的要求是什么意思？谢谢。能具体帮我说一下吗？qiqikang@sohu.com

一般这个10%是指重量百分比，就是说大分子部分和小分子部分最多可以有10%的重量比。

柱子的接法是先大分子量的，再接小分子量的，这样可以提高柱子的使用寿命，因为测小分子量的柱子里的填料颗粒较小，较脆弱，在高流速冲击下容易变形，故放在后面较好，（个人经验）

觉得楼上的观点有点靠谱。

使用混床柱就不用担心这个问题。

能具体解释一下吗？