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水中细菌总数的测定

  • 北京普天同创
    2015/08/26
    • 私聊

水质检测

  • 一、目的和要求
    (1) 了解水细菌学检验的卫生学意义和基本原理，掌握水中细菌总数的检验方法。
    (2）了解平板菌落计数原则。
    二、原理
    水中细菌种类繁多，它们对营养和其他生长条件的要求各不相同，无法找到一种在某种条件下使水中所有细菌均能生长繁殖的培养基。因此，通常选择一种大部分细菌能生长的培养基，通过生长出来的菌落大致计算水中细菌总数。目前一般是采用普通肉膏蛋白陈琼脂培养基。
    三、仪器与试剂
    (1)高压蒸汽灭菌器。
    (2）显微镜。
    (3）灭菌水。
    (4）肉膏蛋白陈琼脂培养基。
    蛋白陈 l0g
    牛肉膏 3g
    氯化钠 5g
    琼脂 15-20g
    蒸馏水 1000m
    将上列成分混合后，加热溶解，调整pH为7.4-7.6，过滤，分装于玻璃容器中，经121℃ (151b①/in2）高压蒸汽灭菌20min，冷暗处备用。
    四、实验步骤
    1．水样的稀释
    根据水被污染程度的不同，可用无菌吸管做10倍系列稀释。
    ①11b=0. 453 592掩，下同。
    2．接种
    以无菌操作方法用灭菌吸管吸取1mL充分混匀的水样，注入灭菌平皿中，再倾注约15mL已融化并冷却到45℃左有的培养基，并立即转动平皿，使水样与培养基充分混匀。每个水样应倾注3个平皿。每次检验时另用3个平皿只倾注营养琼脂培养基作为空白对照。
    3．培养
    待冷却凝固后，翻转平皿，使皿底向上，置于37℃恒温箱内培养24h，进行菌落计数。3个平皿中的平均菌落数即为水样1mL中的细菌总数。
    4．菌落计数
    做平皿菌落计数时，可用肉眼观察，必要时用放大镜检查，以防遗漏。在记下各平皿的菌落数后，应求出同稀释度的平均菌落数，供下一步计算时应用。在求同稀释度的平均数时，若其中一个平皿有较大状菌落生长时，则不宜采用；而应以无片状菌落生长的平皿作为该稀释度的平均菌落数；若片状菌落不到平皿的一半，而其余一半中菌落数分布又很均匀，则可将此半皿计数后乘2以代表全皿菌落数，然后再求该稀释度的平均菌落数。
    五、数据处理
    1．按各种不同情况进行计算
    (1) 首先选择平均菌落数在30-300者进行计算，当有一个稀释度的平均菌落数符合此范围时，则即以该平均菌落数乘其稀释倍数报告。
    (2) 若有两个稀释度，其平均菌落数均为30-300，则应按两者菌落总数之比值来决定。若其比值小于2，应报告两者的平均数；若大于2，则报告其中较小的菌落总数。
    (3）若所有稀释度的平均菌落数均大于300，则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告
    (4）若所有稀释度的平均菌落数均小于30，则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告。
    (5)若所有稀释度的平均菌落数均不在30-300，则以最接近300或30的平均菌落数乘以稀释倍数报告。
    2．菌落计数的报告
    菌落数在100以内时按实有数报告。大于100时，采用2位有效数字，在2位有效数字后面的数值，以四舍五入方法计算，为了缩短数字后面的零数，也可用10的指数来表示，报告菌落数为“无法计数”时，应注明水样的稀释倍数。
    六、注意事项
    (1）严格无菌操作，防止污染。
    (2）根据水样污染程度选择稀释倍数，必要时做预实验。
  • 分
  • 该帖子已被版主-fengdaox加3积分，加2经验;加分理由:话题
相关话题
    +关注 私聊

  • fengdaox

    第1楼2015/08/27

    里面没有提到使用显微镜吧

0
    +关注 私聊

  • 郭景祎

    第2楼2015/08/27

    应助达人

    细菌总数不需要显微镜吧

    fengdaox(fengdaox) 发表:里面没有提到使用显微镜吧

0
    +关注 私聊

  • kimi271243118

    第3楼2015/08/27

    菌落总数不需要显微镜，大肠杆菌才用到

0
    +关注 私聊

  • sangxiao

    第4楼2015/08/27

    培养基现在有现卖的，直接买乳糖单眼发酵培养基就可以了，直接称量溶解煮沸就好。

0
    +关注 私聊

  • 很大的橙子

    第5楼2015/08/27

    显微镜确实用不着吧，除非想镜下鉴别菌种，那样的话还得染色吧

0
    +关注 私聊

  • fengdaox

    第6楼2015/08/27

    除非做镜检，否则用不到

    郭景祎(guojingyi-2010)发表: 细菌总数不需要显微镜吧

0
    +关注 私聊

  • 透明

    第7楼2015/08/27

    这个就是书上的方法吧

0
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  • 透明

    第8楼2015/08/27

    培养基可以买现成的

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    +关注 私聊

  • 繁花血景

    第9楼2015/08/28

    做了这么久都没用过显微镜=-=做浮游植物会用到

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