首先非常感谢月旭公司提供的超高压液相柱免费试用机会,这是本人第一次使用超高压液相柱,感觉超高压液相柱相比于普通液相柱各个方面都很棒。
这里简单谈谈我试用月旭这款超高压液相色谱柱的情况,本来是准备做样品中有机酸分析,后因有机酸标品未到货,故而尝试20种游离氨基酸的分析,这里仅仅只是做了标品的对照。仪器为Agilent 1290 Infinity,实验条件如下:以2, 4 -二硝基氟苯(DNFB)作衍生化试剂,0.015 mol/L磷酸氢二钠和磷酸二氢钾缓冲液(pH=7.50)和50%乙腈水溶液为流动相,采用反相HPLC法分析测定。得到的色谱图如下图所示,按保留时间排序,每个色谱峰对应的组分分别为:天门冬氨酸,谷氨酸,天门冬酰胺,丝氨酸,精氨酸,甘氨酸,苏氨酸,脯氨酸,丙氨酸,缬氨酸,甲硫氨酸,异亮氨酸,胱氨酸,亮氨酸,色氨酸,苯丙氨酸,组氨酸,半胱氨酸,赖氨酸,酪氨酸,其中最强峰为溶剂峰。
条件: Welch Ultimate UHPLC LP-C18 50×4.60mm 1.8micron;梯度洗脱;柱温25℃;DAD检测器,检测波长:360 nm;进样量2 μL。
条件:phenomenexSynergi Hydro-RP 250×4.60mm 4micron;梯度洗脱;柱温25℃;DAD检测器,检测波长:360 nm;进样量10 μL。
从试用效果简单谈下我的感想,从比较情况来看,这款超高压液相柱还是非常不错的,细说主要是以下几点:(一)Welch超高压液相柱相比普通C18柱不仅提高了分离速度,样品保留时间由原来的50min缩减至13min,分析效率得到极大的提高;(二)相比于普通液相柱,Welch超高压液相柱具有较高的灵敏度,分析样品的响应信号有明显的提高,不仅得到较好的峰形,无拖尾现象,并且具有更好的重现性;(三)Welch超高压液相柱的使用,不仅减少流动相中有机溶剂的使用,缩短了分离时间且分析结果更加精确。
当然,测试的过程中也出现一个小插曲,就是液相柱在分析完样品后柱压有明显升高,排查后为柱子堵塞,连续冲了2晚终于柱压正常,这说明超高压液相柱极易堵塞,建议接预柱使用。
最后,对于这次月旭超高压液相柱的试用非常满意,感谢月旭公司能够提供这样的机会。