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镍柱纯化是出现暗红色。
tianru的爸爸
2016/05/06
私聊
生物制药
最近在做镍柱纯化,因为有半胍氨酸,所以用到DTT,但没想到出现暗红色:上样前,在样品(带2mM DTT、8M尿素的Tris-HCl缓冲液)中加入了咪唑,颜色还是无色的,而镍柱是带镍离子的,呈现淡绿色,样品上柱后柱子开始出现变色变暗红色,而随着上样与平衡,暗红色也随之下行。同时我的纯化蛋白也不再挂柱了。
有人做过用DTT的镍柱纯化吗?
原来做镍柱的时候没加过DTT,第一次做带DTT的镍柱,为毛是这个现象?
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