lingshike
第2楼2016/11/21
个人之言,仅供参考。
1、对照品浓度的确定:对照品的峰面积与样品的峰面积应该具有什么关系,就是如何确定对照品的合适浓度?
答:一般对照品浓度与样品中的浓度接近最好。但是我想你如果在中药含量测定过程中,有提取液,浓缩液,干膏等不同阶段的样品,就需要考虑到样品前处理取样量的问题,使样品中测定的含量,就是峰面积,与对照品接近,反之也是选择对照品浓度的一个参考。同时严格来说,这个只是接近就好。因为方法学里面还要做标准曲线的,那里需要计算一个线性范围的。
2、对照品的配制和使用:请问对照品配制后低温保存就行了吗?像我这样的,涉及的试验内容很多,考察流动相、提取时间、提取溶剂,还有方法学考察,每次的对照品现用现配肯定不现实,我可以先配一个大浓度的母液,然后根据需要在容量瓶里进行稀释吗?每次检测之前,从容量瓶里转移一点对照品溶液到液相的小瓶里,这样操作合规吗?再就是配好的对照品溶液可以保持多长时间?怎么进行验证?
答:一般对照品配置后,是低温保存。可以保存多久,需要用实验数据来说话。是可以浓配稀用的。
3、对照品峰面积的变化:我在实验操作中,同样浓度的对照品溶液在连续三天内的峰面积都不一样,这种情况正常吗?受温度、流动相比例的变化和对照品自身等因素的影响,数据完全一致肯定不现实吧?请问有没有相关的要求,有范围上的规定吗?像我这样的,同样的对照品不同天数的峰面积有差异的话数据可信吗?这种问题怎么解决呢?、
答:对照品峰面积每一针都完全一致,是不可能的,多少有些差异。但是范围应该规定多少?我没有细查,还真不知道有无规定。建议你看看中国药典相关资料。这是我以前找的一些资料。供参考。http://bbs.instrument.com.cn/topic/2962595
4、对照品进针次数:用液相进行含量测定时,进针数都是多少啊?我看有说配制两份对照品溶液的,各进两针还是三针的,我想问的是在摸索方法的时候也需要按照这个要求来操作吗?我们还是一个浓度进5针,可行吗?
答:一个对照品,每次测定,可以进两针,可以连续,也可以间隔其他样品。这个地方,我建议是间隔。顺便可以看出对照品的稳定性如何,取平均值对样品含量进行计算。
上述为个人实际工作中的一些经历,希望能有所帮助,供参考。