谁折腾
第5楼2016/10/02
个人觉得截距的大小,往往反映了整条标准曲线是否可用,而不是只考虑截距
个人觉得截距跟空白的关系不大,因为制作标准曲线时,一般各浓度点的响应值要减去空白的响应值,得到净响应值,再参与线性拟合,此时标曲截距跟所有浓度点的响应值有关(当然,如果不是用净响应值进行线性拟合,则跟空白有很大关系),实际样品检测时,需同时测2个及以上的空白,样品响应值减去同批次的空白响应值后(不用再减去标曲的a值),再除于拟合曲线斜率得到结果,此时影响截距的情况有如下2种:
1、如果低浓度点的净响应值偏高,(和/或)高浓度的净响应值偏低,即会导致截距偏大,这种情况简单来说就是灵敏度(标曲斜率)降低;
2、而当低浓度点的净响应值偏低,(和/或)高浓度的净响应值偏高,即会导致截距的绝对值偏大,这种情况简单来说就是标曲斜率升高;
所以建议日常工作中,对标曲斜率进行统计,最近很多帖子有关怎么判断标曲abr三个参数的,一般认为普通的分光光度法的斜率变化幅度要在5%以内,FAAS或GFAAS的好像是10%,同时建议对日常工作中发现波动比较大的浓度点(一般是低浓度点和高浓度点),同时配制3个及以上,以它们的响应值均值参与线性拟合,以降低截距。