本次将介绍在液相条件不变的情况下使用几款不同规格的CAPCELL PAK ADME色谱柱对极性化合物儿茶酸类化合物进行分析。三款色谱柱内径均为2.1 mm ,而粒径分别为S2、S3 及S5。
如图1,峰2与峰3之间的分离度见图上标注。使用CAPCELL PAK ADME S5 (2.1 mm i.d. x 250 mm)、CAPCELL PAK ADME S3 (2.1 mm i.d. x 150 mm)和CAPCELL PAK ADME S2 (2.1 mm i.d. x 100 mm)三款色谱柱对高极性的儿茶酸类化合物进行分析,不论哪一款都能取得良好的保留与对称的峰形。 当L / dp值(L:柱长, dp:粒径)相同时,即使使用小粒径色谱柱,通过缩短柱长也能得到与大粒径色谱柱同等的分离效果。这三款色谱柱的L / dp值相同,从分析结果来看,分离度也基本相当。CAPCELL PAK ADME色谱柱不受粒径大小的影响,对极性化合物的洗脱行为具有等效性,因此可以实现在不改变分析条件的前提下,将HPLC系统切换为UPLC 系统,以达到快速分析的目的。 表1总结了当L / dp值相同时,得到同等分离效果的粒径与色谱柱长之间的关系。
进一步,在对儿茶酸类化合物分析的基础上,为展现2 μm粒径的CAPCELL PAK ADME S2色谱柱在高流速条件下对极性化合物仍然具有良好保留与分离的特长,我们将流速提高至通常流速的3倍(600 µL/min)进行分析,如图2所示,提高流速后依然能得到与通常流速同等的分离效果,实现了高速分析,缩短了分析时间。