从极性到疏水性化合物的广泛分析中,最常使用C18色谱柱进行分析,但有时C18色谱柱对含有多种极性化合物样品的分离效果并不好。
对于这种情况,一个解决方法是使用“反反相色谱柱”进行分析;但是,在不改变流动相条件的前提下使用反相色谱柱,尤其是使用具有高表面极性填料的色谱柱也是有效的解决方法。由于ADME色谱柱键和的官能团不是直链型烷基,而是立体笼状结构的金刚烷基,因此它具有与常规C18填料完全不同的独特保留分析能力。
本次,在UPLC系统下,使用2μm粒径、最大耐压值为100MPa的CAPCELL PAK ADME S2色谱柱,在梯度条件下对极性化合物核苷进行分析,并与2μm粒径的C18色谱柱分析结果进行了对比。
在此,使用CAPCELL PAK ADME S2(上段红)、CAPCELL PAK C18 IF2 S2(中段黑)和Sub 2 μm C18色谱柱(下段黑) 3款色谱柱,通过改变梯度条件,即改变B相(乙腈)的初始比例,对相应的分离模式进行了比较。
梯度方法的分离,除了填料表面的相互作用之外,也会受到流动相组成变化的影响,因此分离的可能性也有所增加。如图2,改变B相初始比例得到不同分析结果:
本分析例说明,即使同样是导入C18基团的色谱柱,根据其导入方式、导入量和材料的不同,其填料表面特性也有所不同,对于分离模式的影响也有不同作用。另外,在本次分析中,因键和独特官能团而具有独特表面特性的CAPCELL PAK ADME S2色谱柱,在B相初始比例为0%时,尿嘧啶核苷(峰2)和脱氧胞苷(峰3)得到了良好分离。
ADME色谱柱键合的是金刚烷基而非直链型烷基,因此具有独特的分离特性,与梯度条件中流动相比例对分离的影响相结合,使得目前分离较为困难的极性化合物能够拥有更多的分离可能性。