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色谱定量分析中 选内标法or外标法 ?傻傻分不清楚

  • happytiankong1
    2015/07/01
  • 私聊

厂商论坛

  • 色谱分析的重要作用之一是对样品定量。而色谱法定量的依据是:组分的重量或在载气中的浓度与检测器的响应信号成正比。常见定量分析方法分为面积归一化法、内标法、外标法、标准曲线法等。
    大家常常容易傻傻分不清楚的莫过于内标法、外标法了
    以内标法为例,选一与欲测组分相近但能完全分离的组分做内标物(当然是样品中没有的组分),然后配制欲测组分和内标物的混合标准溶液,进样得相对校正因子。
    再将内标物加入欲测组分的样品中,进样后测得欲测组分和内标物的定量参数,用内标法公式计算即可。
    其实,从定义上来区分的话,外标法就是用标准品的峰面积或峰高与其对应的浓度做一条标准曲线,测出样品的峰面积或峰高,在标准曲线上查出其对应的浓度,这是最常用的一种定量方法;
    内标法是对应外标法说的,内标法是将一定量的纯物质作内标物,加入到准确称量的试样中,根据被测试样和内标物的质量比及其相应的色谱峰面积之比,来计算被测组分的含量。
    外标法需要用样品和标准品对比,但是有时我们很难保证样品和标准品进的体积是一样的,毕竟要有误差,这时候就用内标法,就是在外标法的基础上,在样品和标准品里在加入一种物质,通过加入物质的峰面积或峰高的变化,就可以看出我们标准品和样品进样体积的差别,但同时会引进加入物质的秤量误差。所以一般用外标法来定量,如果进样体积很难掌握,就用内标法,可以消除进样体积的误差。
    标准加入法标准加入法
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  • happytiankong1

    第1楼2015/07/01

    选择内标物有4个要求:
    1.内标物应是该试样中不存在的纯物质;
    2.它必须完全溶于试样中,并与试样中各组分的色谱峰能完全分离;
    3.加入内标物的量应接近于被测组分;
    4.色谱峰的位置应与被测组分的色谱峰的位置相近,或在几个被测组分色谱峰中间。
    内标法的优点:测定的结果较为准确,由于通过测量内标物及被测组分的峰面积的相对值来进行计算的,因而在一定程度上消除了操作条件等的变化所引起的误差。
    内标法的缺点:操作程序较为麻烦,每次分析时内标物和试样都要准确称量,有时寻找合适的内标物也有困难。
    外标法简便,但进样量要求十分准确,要严格控制在与标准物相同的操作条件下进行,否则造成分析误差,得不到准确的测量结果。
    内标与外标都是定量的一种方法而已,至于哪一种方法好与不好不能一概而论,做不同的分析,面对着不同的要求,再加上分析成本分析效率等等问题,我想简单而有效进行定量分析来满足要求才是最重要的。

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  • happytiankong1

    第2楼2015/07/01

    如果应用外标法能够满足要求的话,当然首选还是外标法,毕竟简单而省事。对于精密度要求比较高、结果准确度会产生重大影响、实验室条件不是很理想的等等条件下,用内标法还是必要的。但无论应用那种方法,方法的验证和确认都是很重要的,只要是按照程序经过验证和确认的方法,都有其应用的空间的。个人观点,供大家参考。

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  • dahua1981

    第3楼2015/07/02

    应助达人

    有合适的内标我感觉还是内标更方便

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  • happytiankong1

    第4楼2015/07/02

    可能还是得看实验,我们有些用户就比较喜欢用内标

    dahua1981(dahua1981) 发表:有合适的内标我感觉还是内标更方便

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  • dahua1981

    第5楼2015/07/03

    应助达人

    我也喜欢用内标

    happytiankong1(happytiankong1) 发表: 可能还是得看实验,我们有些用户就比较喜欢用内标

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  • 夏天的雪

    第6楼2015/07/06

    应助达人

    内标更准吧,但是内标物有点麻烦

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  • 999youran

    第7楼2015/07/06

    一般采用外标 省事些

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  • hujiangtao

    第8楼2015/07/06

    应助达人

    液质做动物组织的兽药残留内标法好些

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  • langyabeilei

    第9楼2015/07/10

    应助达人

    选择合适的内标真的很困难,不过确实比外标准确一些哦

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