正如前面帖子中介绍的,键合独立笼状金刚烷基的CAPCELL PAK ADME色谱柱,对强极性化合物具有良好保留与分离能力。 因此,当使用常规的C18柱分析极性化合物而难以取得良好的保留与分离时,可以将ADME色谱柱作为第二选择进行分析尝试。 在此,为大家介绍一个强极性代谢产物和强疏水性代谢前体共同分析的例子。 分别使用CAPCELL PAK ADME S3和CAPCELL PAK C18 MGII S3色谱柱,对他莫昔芬及其代谢产物4-羟基他莫昔芬进行共同分析。 抗癌药物他莫昔芬经肝脏代谢后,一部分将转化为(Z)-4-羟基他莫昔芬。 本实验对他莫昔芬、(Z)-4-羟基他莫昔芬和(E)-4-羟基他莫昔芬进行了共同分析。
如图1所示,与CAPCELL PAK C18 MGII S3相比,CAPCELL PAK ADME S3对代谢产物4-羟基他莫昔芬的保留作用更强,能与死时间附近溶出的许多杂质得到充分分离;同时,使用CAPCELL PAK ADME S3可实现对非对映异构体Z体与E体的分离。由于分子量相同,使用MS检测非对映异构体时,也需要使用色谱柱对其进行分离。 进一步,为了验证CAPCELL PAK ADME对非对映异构体进行分离的优势,使用马来酸和富马酸(顺反异构)作为样品,对CAPCELL PAK ADME和CAPCELL PAK C18 MGII两款色谱柱进行了比较。其中,还选择了马来酸和富马酸羧基酯化后形成的马来酸二乙酯、富马酸二乙酯,以及碳链更长、疏水性更强的马来酸二乙基己酯及富马酸二乙基己酯,对互为非对映异构体的酯化产物们进行了分析。具体结果如图2所示。
从以上结果可以看出,对于极性弱、疏水性强的马来酸二乙基己酯和富马酸二乙基己酯,使用CAPCELL PAK C18 MGII分析能够得到更好的分离(③);而对于极性强的马来酸和富马酸,使用CAPCELL PAK ADME能够得到更好的分离效果(①)。