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SEC检测PEG分子量

凝胶色谱(GPC)

  • 最近用SEC测PEG分子量,检测条件-流动相 :0.1M硝酸钠水溶液 流速:1ml/min 柱温:40℃ 检测器:示差检测器 进样浓度:2mg/ml 进样体积:100微升。样品分子量20K左右,现在情况是样品峰和二聚物(40K)的分离不好,领导要求基线分离,请问各位大神条件怎么优化。柱子用的是SB-800 HQ系列(803,804)串联
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  • 小不董

    第1楼2017/10/25

    应助达人

    型号    排阻限(支链淀粉)    NTP*    型号    排阻限(PEG)(支链淀粉)    NTP*
    SB-802 HQ    4*103    >12000    SB-2002    4*108    >9000
    SB-802.5 HQ    1*104    >16000    SB-2002.5    1*104    >12000
    SB-803 HQ    1*105    >16000    SB-2003    1*105    >12000
    SB-804 HQ    1*106    >16000    SB-2004    1*106    >12000
    SB-805 HQ    4*106    >12000    SB-2005    4*106    >12000
    SB-806 HQ    (2*107)    >12000    SB-2006    (2*107)    >12000
    SB-806M HQ    (2*107)    >12000    SB-2006M    (2*107)    >12000
    SB-G    SB-800 HQ系列保护柱    SB-LG    SB-2000 HQ系列保护柱

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  • 小不董

    第2楼2017/10/25

    应助达人

    根据其色谱柱信息和你样品的特性, 目标物的分子量相对柱子偏小,使用分离分子量更小的会好些。

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  • Young008

    第3楼2017/10/25

    谢谢大神的回答。那(1)如果不换柱子应该从哪些方面优化(2)如果要换的话,有没有推荐的柱子(3)领导现在想DMF做流动相,因为叠氮化钠比较麻烦,如果换DMF有什需要注意的,管线有啥要求没?,求解答

    小不董(doxw0323) 发表:根据其色谱柱信息和你样品的特性, 目标物的分子量相对柱子偏小,使用分离分子量更小的会好些。

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  • 小不董

    第4楼2017/10/26

    应助达人

    PEG是可以用DMF也可以用水相测试,居然你有水性柱, 再买个能测定更低分子量的色谱柱就好了。叠氮化钠是难买些,但买了一瓶可以用很久的,如果你能保证经常更换水,不让他张菌也可以。也有加一定比率的甲醇来抑制细菌的。
    但 如果你要使用DMF测定,那就要更换柱子,更换成有机相色谱柱,还要能耐DMF的柱子。DMF的粘度很大,而且毒性也较大。
    首先你要确定用什么相的色谱柱,再根据分子量大小来选择合适分子量范围的色谱柱。

    Young008(v3105897) 发表: 谢谢大神的回答。那(1)如果不换柱子应该从哪些方面优化(2)如果要换的话,有没有推荐的柱子(3)领导现在想DMF做流动相,因为叠氮化钠比较麻烦,如果换DMF有什需要注意的,管线有啥要求没?,求解答

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  • tigertooth

    第5楼2017/11/06

    测PEG首选是水相,其它流动相信号弱,溶解性也不好,但要把4000和2000的基线分离难度有点大,换802或802.5试试。
    DMF里不用加叠氮钠,水相倒是必须加,DMF里一般加LiBr或硝酸钠。

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  • Young008

    第6楼2017/11/07

    是2万和4万。。。。不是2000和4000。如果我在加一根803会不会变好,但是这样分析时间肯定会变长,头疼

    tigertooth(tigertooth) 发表:测PEG首选是水相,其它流动相信号弱,溶解性也不好,但要把4000和2000的基线分离难度有点大,换802或802.5试试。
    DMF里不用加叠氮钠,水相倒是必须加,DMF里一般加LiBr或硝酸钠。

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  • lu_sunshine

    第7楼2017/11/08

    应助工程师

    水相即可,串联排阻尺寸小的色谱柱。或者你可以适当降低流速,温度也可以降低30度。适当增加盐的浓度。

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  • taguimin

    第8楼2018/07/26

    还需要吗?我有方法!

    Young008(v3105897) 发表: 谢谢大神的回答。那(1)如果不换柱子应该从哪些方面优化(2)如果要换的话,有没有推荐的柱子(3)领导现在想DMF做流动相,因为叠氮化钠比较麻烦,如果换DMF有什需要注意的,管线有啥要求没?,求解答

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