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死体积和滞后体积间的区别是什么？

Kromasil鲲霆

2017/10/26

死体积也被称作柱外体积，是由高效液相色谱系统从注射进样点到出峰检测点之间的流径空间组成，当然这里不包括色谱柱本身。因此，它包括样品注射体积，注射器内空间，色谱柱前后连接导管体积，末端安装配件和毛塞所产生的空间，以及贯流分析池体积。死体积可以通过将色谱柱更换为零体积接头来测量。注射入非常少量的样品，测量从注射点到出现信号峰最高值的时间。用所测得的时间乘以流速就可以估计出系统所占据的死体积。
滞后体积或称梯度滞后体积的存在是造成溶液梯度形成延后的原因。在梯度高效液相色谱系统中，滞后体积定义为处于混合室和色谱柱入口之间的流径空间。这部分体积在等强度洗脱过程中确实存在，但在那种情况下，它对于分离效果不产生影响。梯度滞后体积组成包括梯度混合室，连接混合泵的导管，泵头和检测阀门，连接泵和注射器的导管，注射器自身，以及注射器到色谱柱入口间的导管。梯度溶液制作启动后，在梯度溶液通过滞后体积前色谱柱内的液流组分尚未改变。在此期间，色谱柱处于等强度洗脱过程中。在不同设备间复制梯度洗脱操作要谨慎从事。即便是在同一根色谱柱上用相同的方法操作色谱过程，滞后体积如果有变化，样品保留时间很可能也会改变。滞后体积可以通过实现从100%甲醇到100%甲醇+10 g/mL苯乙酮梯度溶剂的配制过程来测量。紫外检测器可以检测到一条S形信号线。滞后体积等于注射点到检测信号线S型区间半高处的时间和流速的乘积。

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dingshx

第1楼2017/10/30

学习一下

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abcpgf

第2楼2017/12/03

应助达人

谢谢科普，学习了。

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Kromasil

第3楼2017/12/06

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