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按照国标21312的方法做喹诺酮类做加标回收,回收率低

  • 2196952854
    2018/04/26
  • 私聊

液质联用(LCMS)

  • 第一次处理样品做加标回收,用猪肉做的,提取和净化过程都是按国标来的。测定结果 恩诺沙星的回收率65%,其他氧氟沙星、培氟沙星、洛美沙星、诺氟沙星直接就没出峰。 加标量 40ug/kg 实验室的离心机达不到10000r/min,我用的是最高4500r/min离心20min。
    提取液总体积是40mL,净化后洗脱用了8mL的甲醇,氮吹后用2mL 0.2%乙酸水定容的。
    请大神帮忙分析一下,除了洗脱和氮吹后定容会损失还有哪些地方损失了?有比较简单有效前处理方法么?
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  • weiqing1983

    第1楼2018/04/26

    应助达人

    可采用内标法试试,我们一般用2%甲酸乙腈作为提取液,内标法计算,回收率一般都在70%-130%,复溶液用5MM乙酸铵水溶液(含0.1%甲酸):乙腈=1:1。

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  • 2196952854

    第2楼2018/04/26

    你好,净化也是用的固相萃取柱么,流动相用的是乙腈跟2%的甲酸水么?各种组分的出峰时间能分开么,我做的出峰很集中,都没分开?

    weiqing1983(weiqing1983) 发表:可采用内标法试试,我们一般用2%甲酸乙腈作为提取液,内标法计算,回收率一般都在70%-130%,复溶液用5MM乙酸铵水溶液(含0.1%甲酸):乙腈=1:1。

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  • weiqing1983

    第3楼2018/04/27

    应助达人

    氮吹之后,复溶液复溶,用乙腈饱和正己烷去油,离心后取下层过0.22微米滤膜上机就可以了,不用固相萃取柱。流动相A:5MM乙酸铵水溶液(含0.1%甲酸)B:乙腈,梯度洗脱。

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  • 2196952854

    第4楼2018/04/27

    你好,超声提取之后,直接氮吹复溶么,不需要离心?我看网上有人说离心转速对提取效果影响挺大。

    weiqing1983(weiqing1983) 发表:氮吹之后,复溶液复溶,用乙腈饱和正己烷去油,离心后取下层过0.22微米滤膜上机就可以了,不用固相萃取柱。流动相A:5MM乙酸铵水溶液(含0.1%甲酸)B:乙腈,梯度洗脱。

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  • weiqing1983

    第5楼2018/04/27

    应助达人

    超声提取或者振摇提取都可以啊,我们是提取三次的,需要离心取上清液,旋蒸或者氮吹至干都可以。

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  • hujiangtao

    第6楼2018/04/28

    应助达人

    沙星类用农业部1025-14-2008公告磷酸盐缓冲溶液提取效果还不错

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  • 2196952854

    第7楼2018/04/28

    你好,提取液在氮吹复溶之前需要去油么?

    weiqing1983(weiqing1983) 发表:超声提取或者振摇提取都可以啊,我们是提取三次的,需要离心取上清液,旋蒸或者氮吹至干都可以。

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  • weiqing1983

    第8楼2018/04/28

    应助达人

    嗯,如果氮吹定容后溶液明显比较浑浊的话,还是去一下油比较好。

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  • 2196952854

    第9楼2018/05/02

    你好, 提取液2%甲酸乙腈是乙腈中含2%的甲酸么?还是用2%的甲酸水跟乙腈按比例混合?我打算用这个方法重新做一下

    weiqing1983(weiqing1983) 发表:超声提取或者振摇提取都可以啊,我们是提取三次的,需要离心取上清液,旋蒸或者氮吹至干都可以。

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  • weiqing1983

    第10楼2018/05/02

    应助达人

    是乙腈中含2%甲酸(取20ml甲酸用乙腈定容至1L),不加水,含水的话在氮吹或者旋蒸时就会一直干不了了。

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