巧用比浊仪协助判定试管凝集试验结果

栀子花开

2018/07/27
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巧用比浊仪协助判定试管凝集试验结果
1背景介绍
布鲁氏菌病（简称布病）是由布鲁氏菌属细菌致人畜共患的传染病，世界范围性威胁人类健康和影响畜牧业发展，其临床特征是雌性流产、乳腺炎、不育和各种组织（如睾丸、关节）的炎症。世界动物卫生组织（OIE）将布病列为B类重要传染病，中华人民共和国传染病防治法将布病列为乙类传染病。
为筛查和及时确认动物是否感染布病，每年农业部门要对易感动物（如奶牛、羊）进行定期监测，常用的方法为试管凝集试验。具体做法是：将血清按一定比例进行倍比稀释，加入抗原置于37℃温箱中反应24h，取出检查并记录结果。
每次实验需配制比浊管，作为反应程度的判定依据。因抗原为白色的混悬液，按不同比例稀释后呈现不同的混浊程度，故可以作为判定反应程度的依据。比浊管配制方法如下：

管号	抗原	稀释液	清亮度%	记录标记
1	0.00	1.00	100	++++
2	0.25	0.75	75	+++
3	0.50	0.50	50	++
4	0.75	0.25	25	+
5	1.00	0.00	0	-

2试管凝集试验存在的问题
按照标准要求，样品的反应程度（即浊度）的判定采用目视法。该法在不同实验人员之间存在很大的不确定性，容易引起误判。
3改进
实验室有一台生物梅里埃公司生产的DENSIMAT电子比浊仪，原用于测定细菌悬浊液麦氏单位。因试管凝集试验结果判定中，只是将样品管与5支比浊管进行浊度比较，并不涉及浊度的实际数值，故尝试利用比浊仪协助判定试验结果。方法如下：
3.1测试比浊管浊度
逐一将比浊管插入比浊仪中，读取浊度值。经反复测试，读数均非常稳定，一般多次测定中只是偶尔会出现0.1个单位的偏差，故采用多次测定取出现次数最多的读数为准。实测值如下：

比浊管号	1	2	3	4	5
浊度值	0.1	0.6	1.2	1.6	1.8
记录标记	++++	+++	++	+	-

3.2测试样品管浊度
逐一将样品管插入比浊仪中，读取浊度值，并进行反应程度的标记。因样品管浊度值与比浊管浊度值不完全一致，采用取各比浊管间平均值后进行判定，具体如下：

浊度值	< 0.35	0.35~0.9	0.9~1.4	1.4~1.7	>1.7
记录标记	++++	+++	++	+	-

本次实验共检测样品5份，每份样品4个稀释度，实测值及判定如下：

样品号	1:25		1:50		1:100		1:200		效价判定
样品号	浊度值	标记	浊度值	标记	浊度值	标记	浊度值	标记	效价判定
1	0.4	+++	0.4	+++	0.3	++++	0.2	++++	≥1:200
2	0.2	++++	0.1	++++	0.4	+++	1.5	+	1:100
3	1.9	-	1.8	-	2.1	-	1.9	-	<1:25
4	0.1	++++	0.1	++++	0.3	++++	1.5	+	1:100
5	0.1	++++	0.2	++++	0.4	+++	1.3	++	≥1:200
6	0.3	++++	0.3	++++	0.2	++++	0.2	++++	≥1:200