粮谷中沙蚕毒素类农药的测定（上）

应助达人

1、沙蚕毒素类农药的背景及作用

沙蚕毒素类杀虫剂是20世纪60年代兴起的一种新型有机合成的仿生杀虫剂。1974年，我国贵州省化工研究所首次发现了杀虫双对水稻螟虫的防治效果，并成功将其开发为商品。

沙蚕毒素类杀虫剂极易渗入昆虫的中枢神经节中，侵入神经细胞间的突触部位，中毒后虫体很快麻痹、身体软化瘫痪，直至死亡。



沙蚕毒素类农药是一种广谱杀虫剂，具有很强的触杀、胃毒及一定的内吸、熏蒸作用，还有拒食、杀卵、低毒低残留以及施药适期长、速效、持效期长、防效稳定等多种优点。

因此，这类杀虫剂在60年代用于农业防治后，就迅速得到了推广作用。

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2、沙蚕毒素类农药的危害

沙蚕毒素类农药虽然对害虫产生神经毒素，能杀死害虫，雄性大鼠经口半数致死量LD50=451mg/kg，但暂未发现对人体有致畸性癌变等重度安全隐患。

目前我国对于沙蚕毒素类农药残留限量有明确规定，根据国家标准GB 2763-2016规定沙蚕毒素类农药限量为：



3、沙蚕毒素类农药已有的相关检测方法

随着沙蚕毒素类农药的广泛推广施用，其残留状况也成为关注热点。目前国内外关于沙蚕毒素类农药检测的文献较少，其检测方法主要有衍生化气相色谱法、气相色谱-质谱法、液相色谱-紫外法等。

衍生化气相色谱法操作步骤较多，分析时间长，容易产生干扰，结果重现性不理想；气相色谱-质谱法分析时间较长、检出限相对较高；液相色谱-紫外法在检测复杂样品中的待测物时往往需要繁琐的前处理步骤，不利于简便、快速检测，且灵敏度有限。

那么，针对沙蚕毒素类农药残留，是否有更加快速高效的检测方法呢?

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主要给大家介绍一种针对粮谷中沙蚕毒素类农药残留的快速检测方法--液相色谱-串联质谱法。
1、方法前处理，农药基本提取过程

实验将大米、玉米、小麦样品前处理：用粉碎机粉碎后，称取5 g(精确至0.001 g)，置于50.0 mL离心管中，加入10.0 mL乙腈，在摇床震荡提取30 min，在9500 r/min条件下，离心5 min，取2.00 mL上清液，待净化。称取0.1 g PSA于10.0 mL离心管中，加入上述待净化液，涡旋震荡30 s后，9500 r/min条件下，离心5 min，取上清液过0.45 μm滤膜通过液相色谱-串联质谱检测。

2、固相萃取剂的选择

由于食品基质复杂，形态多样，为降低基质效应的影响，本实验采用固相萃取对目标样品进行净化。试验采用石墨化炭黑（GCB），C18粉，PSA粉对样品提取液进行净化，选择大米作为基质，三种物质添加水平均为80.0μg/kg，考察石墨化炭黑（GCB），C18粉，PSA粉，不同固相萃取剂的净化效果。

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石墨化炭黑回收率为56.3~61.8%，C18粉回收率为80.6~84.6%；PSA粉回收率为90.2~95.1%；因此，前处理过程采用PSA粉净化效果较为理想。实验结果见图1。


图1 不同固相萃取剂的实验回收率
3、固相萃取剂的用量优化

PSA粉量的优化。选择粮谷类大米作为基质，添加水平为80.0μg/kg 杀螟丹、杀虫环、杀虫双，考察0.02g、0.05g、0.1g、0.2g、0.5g不同含量PSA粉的净化效果。当PSA粉的添加量超过0.1g时，回收率几乎无变化趋势。因此选择0.1g PSA粉为最佳添加量。实验结果见下图2。



图2 不同质量PSA实验回收率

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4、线性关系的测定及检出限
将杀虫环、杀虫双标准储备液配制成1.00、2.00、5.00、10.0、20.0、50.0、100 ng/mL系列质量浓度的溶液；杀螟丹标准储备液配制成10.0、20.0、50.0、100、200、500 、1000 ng/mL系列质量浓度的溶液；按上述仪器条件检测，以质量浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标绘制标准曲线，结果表明：



3种农药的线性方程、线性范围、相关系数和方法检出限



5、方法回收率验证

在样品中，添加不同系列质量浓度的沙蚕毒素类农药标准品，在相同条件下测定沙蚕毒素类农药的含量并计算回收率。回收率在80.6%~97.5%，精密度在1.09%~3.61%之间，符合GB/T 27404-2008实验室质量控制规范要求（见表3）。

表3 样品中3种沙蚕毒素类农药回收率和相对标准偏差



6、小结

实验表明：该方法重现性好、准确度高、简便、快速，检出限低，满足GB2763-2016《食品安全国家标准 食品中农药最大残留限量》粮谷中杀虫双、杀虫环、杀螟丹的检测要求，为相关检测标准的制定提供了技术支撑；同时也为相关产品安全生产，市场监管提供了重要检测依据。


参考文献
中国预防医学科学院营养与食品卫生研究所. GB/T 5009.114—2003 大米中杀虫双残留量的测定. 北京: 国家标准化管理委员会, 2003.
唐亮, 李伟声, 周游, 等. 杀虫双在甘蔗上的消解动态研究. 西南农业学报, 2013, 26(2): 633-636.
应剑波, 徐洁蕾. 快速溶剂萃取-气相色谱-质谱/质谱法测定动物组织中沙蚕毒素类农药. 理化检验: 化学分册, 2010, 46(5): 539-541.
许来威, 张雪冰, 邢红. 杀虫双水剂的高效液相色谱分析. 农药,2001, 40(2): 16-17.
乔禹欣, 陈国峰, 马诚义等. QuEChEＲS-超高效液相色谱-串联质谱法测定麦田环境中的磺酰胺类残留［J］.食品工业科技, 2017, 38(23) : 221－225.

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这是一篇论文

老师用气质方法做，按您说的前处理方法，可以做吗？在气质上有响应吗？气相上做一定要用衍生化才能检测吗？望您有时间解惑。

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粮食类的还是应该先水化

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直接用乙腈提，回收率高不能说明提取效率就高，毕竟是后加进去的