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Kromasil技术支持Q&A---第一弹！！！

吕梁山

2019/01/25

1. Q：Kromasil AmyCoat或CelluCoat手性色谱柱在正相和反相模式下都适用吗？
A：是的，Kromasil手性色谱柱能在正相模式、反相模式下工作。普通色谱柱在正相和反相模式工作状态下（醇类或乙腈，流动相不含烷烃）能达到柱效的上限。通过100%乙醇或异丙醇平衡色谱柱，可以将色谱柱内含的手性固定相转化为反相模式。当然，此时的固定相也同样能恢复到初始的工作模式。手性色谱柱模式经过转换后，通过比较反相和正相工作模式下的塔板数发现柱效上会有一定的损失。因此建议通常在反相模式下工作的客户，直接购买反相模式手性柱AmyCoat RP和CelluCoat RP，以获得最高柱效。

2. Q：Kromasil色谱柱能在100%水相中工作吗？
A：Kromasil C4、C8、C18反相色谱柱必须在至少含有5%有机相的流动相中工作。在100%水相中，柱内填料很可能会发生疏水塌陷。如果疏水塌陷已经发生，在色谱柱上连续泵入40分钟左右含有机相的流动相直至有机相含量至少达到50%，色谱柱就可以恢复到初始水平。

3. Q：如何最大限度提高色谱柱使用寿命？
A：一半以上色谱柱失效问题是由堵塞造成的，因此提高色谱柱使用寿命的一个关键点就是使用0.2微米滤膜预先过流动动相和样品。
另一个重要方面是流动相和填料的相容性。标准反相固定相填料在1.5-9.0的pH值区间内表现很稳定。在特定条件下（有机缓冲溶溶液作为流动相），固定相填料在pH值高达12的情况下仍能保持很高的化学稳定性。如果您希望在pH值超过9的条件下使用经典Kromasil色谱柱，请咨询我方技术支持团队。通常情况下，对于硅胶基质固定相而言，有机缓冲溶液要比磷酸盐或者碳酸盐类无机缓冲溶液更加温和。如果现有方案需要在高pH值条件下运行，请选择耐受pH值达到12的Kromasil Eternity系列产品。

此外，应避免含有缓冲成分的流动相在色谱柱内静置时间超过10分钟。此时，应该降低流动相流速（4.6毫米内径色谱柱流速为0.1ml/min），或者将含有缓冲成分的流动相置换为非缓冲性质流动相（比如水/乙腈=70/30）以避免流动相中缓冲盐析出堵塞色谱柱。

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