【大曹色谱 液相豆丁帖】 峰形变差怎么办？Part 1前延

在前几期液相豆丁帖的帮助下，压力终于稳了，保留时间也稳了，可峰形这是？

前延！



拖尾！



裂峰！



怎么办怎么办？
别慌~让我们一个一个来~
首先，YoYo来帮您看看峰形前延问题

- 前 延 原 因 -

色谱柱自身出现问题
1） 所有色谱峰均出现类似前延现象

液相方法或化合物结构问题
1） 溶剂效应
2） 样品过载
3） 化合物结构

- 诊 断 方 法 -

1. 根源：色谱柱
→ 现象：所有色谱峰均出现类似前延现象

也就是说，不论是死时间的溶剂峰，还是杂质峰，乃至主峰，均出现类似的前延峰形，如上图，可以看到所有峰的不对称因子均在0.7左右，呈现前延。
看到这种色谱图，基本就可以断定是色谱柱自身出现了问题。

解决方案：
一般情况下，当色谱柱问题导致峰形前延时，多为填料被腐蚀、受损所致。如下图，色谱柱入口端填料由于被腐蚀，已经出现了部分缺失的现象。



对于这种情况，可以尝试对色谱柱进行冲洗再生，但多数情况下效果并不理想，需要更换新的色谱柱。

大曹三耀の常规反相色谱柱冲洗方法
↓↓↓
20%乙腈小流速冲洗过夜→80%乙腈冲洗2h

2.根源：液相方法 or 化合物结构

2.1.溶剂效应
样品溶剂和流动相差异较大时出现。举个栗子，样品以100%乙腈溶解，而流动相为20%乙腈水溶液的情况。洗脱能力的差异或溶解性差异往往会导致峰形不佳的现象。
解决方案：
需要充分考察样品在流动相中的溶解能力，尽可能使用流动相对样品进行溶解。

2.2.样品过载
样品过载也可能导致峰形前延的问题。
解决方案：降低进样量

2.3.化合物自身结构

化合物结构和固定相之间力的作用也可能导致前延峰出现。

解决方案：
→改变流动相pH
→提高缓冲盐浓度
→调整柱温