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凝胶渗透色谱法

wqcylsg

2019/05/08

凝胶色谱（GPC）

用岛津的凝胶渗透色谱（色谱柱 TSK-gel GW PWXL2500）和软件，算酶解寡糖分子的分子量，结果相差很大，用其他方法算，大约1000-2000Da（数均），而用凝胶色谱法大约只有200-300。几乎就是差一个数量级。但是，多个样品之间的变化规律，两种方法测是一致的，（哪个大，哪个小，大多少，算出来都一样）。怀疑是软件计算出了什么问题，但是我找不出来。

我用的是右旋糖酐做分子量标准，是个比较通用的标准了，使用的方法，是测别的糖的方法，和文献里优化的方法不同，但是感觉应该还能用，最主要的几个峰还是有的。
在此请问大家出的是什么问题，谢谢大家了。

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小不董

第1楼2019/05/09

应助达人

凝胶色谱法是根据保留时间来确定分子量，分子量对数和保留时间才具有一定的线性关系，保留时间相差一点就会相差很大，观察到你的样品出峰时间在12.5min时，你看看你的标准样品对应的分子量是多少？这个比较好判断。
另你说用其他方法，指的是什么？不明白。选择不同方法结果不一样，不好说明什么。因素太多。

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