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采用冷冻保藏法保存微生物菌种时需注意几点

北京来亨

2019/06/21

实验室安全管理

冷冻保藏法适用于抗冻力强的微生物。这些微生物可在其菌体细胞外遭受冻结的情况下而不受损伤，而对其它大多数微生物而言，无论在细胞外冻结还是在细胞内冻结，都会对菌体造成损伤，当采用这种保藏方法时，应注意以下几点：
1、原则上应尽快进行冷冻处理，但当加入保护剂时，可静置一段时间后再进行处理。
2、就动物细胞而言，应在-20℃范围内以1℃/min左右的速度缓慢降温，此后必须尽快降到贮藏温度；而对绝大多数微生物而言，则不必如此，如结构较为复杂的原虫则可在-35℃范围内进行缓慢降温，而噬菌体则必需采用上述的二阶段法进行冷冻。
3、要选择适于冷冻干燥的菌龄细胞。
4、要选择适宜的培养基，因为某些微生物对冷冻的抵抗力，常随培养基成分的变化而显示出巨大差异。
5、要选择合适的菌液浓度，通常菌液浓度越高，生存率越高，保存期也越长。
6、若进行长期保存，则贮藏温度越低越好。
7、取用冷冻保存的菌种时，应采取速融措施，即在35～40℃温水中轻轻振荡使之迅速融解。而就厌氧菌来说，则应选择静置融化的措施。当冷冻菌融化后，应尽量避免再次冷冻，否则菌体的存活率将显著下降。
8、菌液内不添加电解质(如食盐等)。
9、可在菌液内添加甘油等保护剂，以防止在冷冻过程中出现菌体大量死亡的现象。同样，也可添加各种糖类、去纤维血液和脱脂牛乳等具有良好保护效果的溶剂，但对有些微生物而言，不加保护剂时更有效。

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北京来亨

第1楼2019/06/21

冷冻保藏法适用于抗冻力强的微生物。

0

yayicuo

第2楼2019/06/21

应助达人

目前冷冻保藏法，对于菌种保持还是一个主要方法。还是需要多研究开发一些更为实用的方法来保藏菌种，毕竟这是一大资源。

0

北京来亨

第3楼2019/06/21

是的
yayicuo(v3253952) 发表:目前冷冻保藏法，对于菌种保持还是一个主要方法。还是需要多研究开发一些更为实用的方法来保藏菌种，毕竟这是一大资源。

0

北京来亨

第4楼2019/06/21

这种方法只适于抗冻力强的微生物
yayicuo(v3253952) 发表:目前冷冻保藏法，对于菌种保持还是一个主要方法。还是需要多研究开发一些更为实用的方法来保藏菌种，毕竟这是一大资源。

0

Insp_18862b4c

第5楼2019/06/21

根据每个菌种的不同，设置不同的温度

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