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药物BBB的通透性，LC-MS预试成功，正式试验却检测不到，求真相

  • Insm_31ac6d6a
    2019/06/21
    • 私聊

液质联用（LCMS）

  • 实验是测定一系列多肽的BBB通透性，大鼠灌流后提取脑中药物进行检测，检测方法起初采用RP-HPLC，没有检测到信号。考虑可能是灵敏度不够，改用液质联用（ESI离子源），流速：0.3ml/min，色谱柱：150×4.6mm，5um，没有保护住。
    预实验中已检测到待测药物峰以及内标物，但后来正式实验中测了很多次，却基本检测不到待测药物，只能测到内标物，只有一两次检测到，且峰面积非常小。再次重复预实验，依然没有测到待测药。更换文献报道能过BBB的药物，仍检测不到（按理应该可以）。我们的整个实验过程与预实验时一模一样，为什么现在就测不到了呢，是不是检测这一步出了问题，（0.3ml/min采用常规4.6um的柱子合适否）还是其他什么地方有问题？
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    +关注 私聊

  • hujiangtao

    第1楼2019/06/21

    应助达人

    感觉还是质谱参数没优化好 重新调谐试试

0
    +关注 私聊

  • weiqing

    第2楼2019/06/21

    应助达人

    此外直接走标曲响应怎么样，如果标曲正常，可能就是基质效应引起的，或者分解了。

0
    +关注 私聊

  • welewolf

    第3楼2019/06/23

    应助达人

    先用液质测几针标准品，如果测试正常，那么可能是基质效应的问题。如果测试不正常，可能是待测物的质谱参数没有优化好。

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