四甲基伞形酮
第2楼2019/06/27
阳性对照需要明确你对照的是整个实验过程还是对某一步,某一种试剂的验证。根据你的需求可以设立不同环节的对照。既可以将阳性标准菌株(也就是该方法的被检菌)加入到第一步的环节中按照标准一路做下去(多见于定性实验);也可以只把阳性菌株,接种到具有筛选功能的固体平板(例如XLD,HE,BS)或者液体培养基中(例如:LST)观察其筛选能力。还可以使用有证标准物质来验证你的培养基的培养能力满足实验需要(例如:菌落总数的标准物质验证PCA培养基)。不过微生物的阳性对照有时候容易出现鸡生蛋蛋生鸡的逻辑问题,你只需要对结果进行评价,而不要反推或者互相验证。
小小菜鸟要自强
第4楼2019/06/28
你们做微生物阳性比对是不是把目标菌种直接加到培养基上培养然后和样品培养结果做比对?还是把菌种和样品一起加到培养基?
四甲基伞形酮
第5楼2019/06/28
你要明确阳性对照的目的,在看怎么设计。而不是说单纯的从第一步就加入菌株,培养后跟样品去比对。首先样品是否含有被检菌就是未知,这不能与阳性对照成为比对关系。简单的说:阳对一般是验证培养基的培养能力及筛选能力。你要想清楚自己的实验哪个步骤需要阳对,这步阳对设立的目的是证明什么。再去看从哪步加入标准菌株。如果仅仅只是证明操作流程的话,人员比对或者外部比对更能说明问题。单从实验的对照来说(以XLD为例)仅仅使用阳性菌株作为对照是不够的。需要接种沙门氏菌(阳性对照:目的证明培养基可以让沙门氏菌生长,并且其菌落特征符合该培养基的典型特征,另外要加入两种隐形对照菌株:大肠埃希氏菌,其作用是证明xld培养基可以具有筛选性能将其他菌与沙门氏菌进行简单的区分;还要加入金葡菌目的证明xld的抑制革兰氏阳性菌的生长。最后是空白无菌水接种,证明你在配置过程中未收到外源性污染。这才是一个微生物实验中该有的对照和对照的真实目的。