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关于β淀粉样多肽1-42在质谱上的响应

Insm_31e6d780

2019/07/29

液质联用（LCMS）

我是将买来的纯品直接溶于0.5 mL ACN：0.1% NH4OH（看文献基本都是溶于碱性条件，并且碱性条件下分离和检测），得到1 mg/mL的储备液，-20℃保存。测样前，用相同的溶剂稀释到10 ug/mL。我用的仪器是Agilent LC-ESI MS/MS,液相是1200系列，质谱是6460 Triple Quad MS/MS。流动相分别是：A：0.1% NH4OH，B：ACN。自动进样器后不经过柱子直接进质谱，10 ug/mL的标样在全扫描模式下得到的质谱图如附件所示，属于该蛋白的带3个、4个、5个和6个电荷的都是出现成簇的峰，例如带4个和5个电荷的离子，即1129.2和903.8，分别是相差5.5和4.4的一系列峰，我现在推测是加钠的峰。是因为在碱性条件下测所以会出现这么强的加钠峰吗？我试过在酸性条件下，加钠现象会很大程度上减弱，但是这个蛋白在酸性条件下溶解得不好，灵敏度也没有提高。我看文献上MRM模式下测这种蛋白检测限能达到1ng/mL左右，而我现在的检测限也就几百ng/mL，不知道是不是加钠现象严重影响了检测灵敏度。或者是我溶解、保存的条件不恰当，导致聚集体产生，而使灵敏度这么低。
全扫描的质谱图请见附图。

分
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weiqing

第1楼2019/07/29

应助达人

可以试试维护一下离子源后重新优化下目标物质谱参数，此外会不会和没经过色谱柱直接进样有一定关系。

0

hujiangtao

第2楼2019/07/29

应助达人

没听说过碱性环境容易导致加钠呀

0

welewolf

第3楼2019/07/29

应助达人

应该是质谱参数没有优化好，优化时建议用蠕动泵（流速设为10-15ul/min），并以一定流速的流动相载入。

0

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