气质联用分析印楝油中脂肪酸成分
摘要：目的 分析印楝油中脂肪酸成分。方法 该实验以印楝果实为原料，利用提取、柱层析得到印楝油，并用气相色谱-质谱联用技术进行分析鉴定, 结合计算机质谱图库检索技术对分离的化合物进行结构分析，采用峰面积归一化法对各组分进行定量分析。结果 鉴定出15种脂肪酸化学组分。结论 全面、准确地分析了印楝油的脂肪酸成分，为印楝油的进一步开发提供依据。
关键词：印楝油; 脂肪酸; 气相色谱-质谱( gc-MS)
Analysis of Fatty Acid Ingredients of Neem oil by Gas Chromatography-Mass Spectrometry
Abstract: Objective To analyze fatty acid Ingredients of neem oil. Methods In this experiment, fatty acid ingredients were separated by extraction and column chromatography and they were identified by capillary gas chromatography-mass spectrometry (gcMS) and computer mass spectrometry library retrieval technology. The relative content of the components were determined with area normalization method. Results Fifteen compounds were detected from neem oil. Conclusion The fatty acid ingredients of neem oil were analyzed comprehensively and accurately. It can provide the basis for further development of neem oil.
Keywords: Neem oil; Fatty Acid; gc-MS
印楝油是从印楝(Azadirachta indica A.Juss)果子中榨取的植物油，具有拒食驱避、降低昆虫肠道活力、抑制昆虫生长发育、抑制和阻止昆虫蜕皮、抑制成虫交配产卵等作用，是制造各生物农药的理想原料。具有杀虫谱广、害虫不易产生抗药性、环境中无残留等特点，能与多种农药及杀菌剂混配。在印度和孟加拉等过度，印楝油最常应用于肥皂、护发产品、身体乳液及护手霜等护理保养产品。印楝油使用的范围从皮肤疾病、感染、发炎症、发烧，甚至应用于风湿症的舒缓等。文献对印楝油成分分析较多，但对其中的脂肪酸含量分析较少，本文采用气质联用对其进行分析，为印楝油的进一步开发提供数据支持。
1 材料
气相色谱质谱联用仪gcMS-QP2010Ultra（日本岛津公司）；98-1-C电热套（天津泰斯特仪器有限公司）；JJ5000A电子天平（常熟市测试仪器有限公司）；ME204万分一天平（梅特勒-多利多国际股份有限公司）。印楝果实采自云南红河州；蒸馏水；甲醇、乙醇、石油醚、乙酸乙酯、正己烷、氢氧化钠、氯化钠（分析纯）；固体试剂干燥处理冷却后均于干燥器中密闭保存。
2 方法
2.1 印楝油提取
取阴干、粉碎的苦皮藤根皮1 Kg，用乙醇回流提取，滤液合并后回收溶剂至浸膏状，取此浸膏用硅胶柱色谱分离，以石油醚-乙酸乙酯(15:1~2:3)溶剂体系进行梯度洗脱，每250ml收集1份，合并相同流分，进行浓缩制得印楝油。
2.2 印楝油甲酯化
甲酯化反应采用三氟化硼甲醇溶剂法。取均匀油样0.2 g于20 mL具塞试管中，再加4 mL氢氧化钠-甲醇溶液（0.5 mol/L）摇匀；60 ℃水浴加热至油珠完全溶解（约30 min），冷却后加入质量分数14%三氟化硼-甲醇溶液2 mL，60 ℃水浴酯化10 min，冷却后加入2 mL正己烷，摇匀，再加入2 mL饱和氯化钠溶液摇匀，过无水硫酸钠干燥，静置，得到2 mL的待测样，上层溶液过滤膜后进行气相色谱-质谱仪进行检测。
2.3 色谱条件
HP-FFAP色谱柱（30 m × 0.32 mm × 0.25 μm）；电离方式：EI；离子源温度：230 ℃；接口温度：220 ℃；进样口温度：260 ℃；程序升温：80 ℃ 保持2min，以5 ℃/min升至130 ℃，保持5min，然后以4 ℃/min升至230 ℃，保持15 min；分流比：15:1；吹扫流量：3.0 mL/ min；溶剂延迟时间：5.0 min；质量扫描范围m/z：30~500 mau；电子能量：70 eV；进样量：1.0 μL；载气：氦气。
3 成分分析
取印楝油的正己烷溶液1.0 μL，用gc-MS 分析鉴定，得出总离子流色谱图，见图1。对总离子流中的各色谱峰进行质谱扫描，通过NIST 11 标准质谱图库，并核对有关文献，确定其中15种脂肪酸化学成分。通过gcMS solution4.20版本化学工作站数据处理系统，采用峰面积归一化法进行定量分析，得出各脂肪酸在印楝油中的相对含量，化学分子式及化学名称见表1。
4 结果与讨论
印楝果实经过提取、柱层析得到印楝油，对印楝油进行分析，通过分析比较得出印楝油中脂肪酸含量主要以油酸、棕榈酸、硬脂酸、亚油酸，分子式分别为C19H36O2、C17H34O2、C19H38O2、C19H34O2，相对匹配度均在93.5以上。本研究对印楝油中不饱和脂肪酸进行分析，为印楝油的下一步开发提供依据。
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