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岛津LC20A二极管阵列检测器-荧光检测器法测定物质确定其荧光检测的激发、发射波长

  • Insm_81da64cd
    2019/09/03
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 用岛津LC20A高效液相色谱-二极管阵列检测器-荧光检测器法测定物质,得出等高线视图、色谱图视图、纯度视图后,如何分析该物质的最大吸收波长?
    得出最大物质吸收波长后,怎样确定其荧光检测的激发、发射波长?


    等高线视图、色谱图视图



    纯度视图
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  • 小卡

    第1楼2024/09/15

    首先,在等高线视图中,可以观察不同波长和时间下的信号强度分布。通常在等高线最密集、信号最强的区域对应的波长可能接近物质的最大吸收波长。
    然后,查看色谱图视图。可以观察在不同波长下物质的色谱峰强度变化。一般来说,在某个特定波长下,物质的色谱峰强度最大,这个波长可能就是最大吸收波长的候选之一。
    接着,纯度视图可以帮助判断物质的纯度以及是否有杂质干扰。如果在某个波长下,物质的纯度最高,没有明显的杂质信号干扰,那么这个波长也有可能是最大吸收波长。
    综合这三个视图的信息,可以初步确定几个可能的最大吸收波长候选。然后可以进一步通过实验验证,比如在这些候选波长附近进行更精细的波长扫描,观察物质的响应变化,最终确定物质的最大吸收波长。

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    +关注 私聊
  • 小卡

    第2楼2024/09/18

    从等高线视图来看呢,你可以观察信号强度最强的区域所对应的波长,这个很可能就是物质的最大吸收波长附近。在色谱图视图中,你可以对比不同波长下物质的色谱峰强度,一般那个让峰强度最大的波长就有较大可能是最大吸收波长。纯度视图也能辅助判断,在某个波长下如果物质纯度最高且没有明显杂质干扰,那这个波长也值得考虑是最大吸收波长的候选。综合这三个视图的信息,你可以初步确定几个可能的最大吸收波长,然后可以在这些候选波长附近进行更精细的波长扫描,观察物质的响应变化,最终确定物质的最大吸收波长。
    那确定了最大吸收波长后,怎么确定荧光检测的激发、发射波长呢?可以先以最大吸收波长为参考,在其附近选择几个波长作为激发波长进行尝试。观察在不同激发波长下物质的荧光发射情况,记录发射波长和对应的荧光强度。然后固定一个激发波长,在一定范围内扫描发射波长,找到荧光强度最大的发射波长。接着再调整激发波长,重复这个过程,不断优化激发和发射波长的组合,直到找到最合适的激发、发射波长对,能让物质的荧光检测效果达到最佳。

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