仪器信息网APP
选仪器、听讲座、看资讯
立即体验
APP内打开
回版面
评论
收藏
点赞
拍砖
举报
取消
发布
当前位置:
仪器社区
>
色谱
>
液相色谱(LC)
>
帖子详情
高效液相色谱基础篇|关于反相色谱柱维护保养及注意事项小知识
p3203140
2024/09/30
私聊
液相色谱(LC)
承接上回,我们说了一下反相色谱柱的原理、构造、分离机制及使用过程中的影响因素,今天主要说说它的维护保养和相关的注意事项,色谱柱固有一死,但好的操作还是能延缓它的生命周期的。
01.反相色谱柱的维护
1)
新柱活化:
新色谱柱首次使用前,通常需要用纯有机溶剂(如甲醇或乙腈)冲洗,以去除可能残留的其他杂质。
2)
流动相和样品的清洁:
确保流动相和样品无颗粒物和微生物污染,以避免堵塞色谱柱。使用HPLC级溶剂,并在必要时过滤流动相和样品。
3)
使用保护柱:
在色谱柱前加装保护柱,可以有效防止颗粒物进入分析柱,延长其使用寿命。
4)
柱子的保存:
短期内不使用时,应将色谱柱保存在高比例的有机相中,如甲醇或乙腈。长期不使用时,应按照制造商的推荐条件保存,并确保柱子两端密封,避免溶剂挥发。
5)
避免长时间未使用:
如果色谱柱长时间不使用(超过6个月以上不用时),应定期用适当的溶剂冲洗,以防止固定相的流失或柱床的干涸;如果使用缓冲盐,分析结束后应先用水冲洗,再用有机溶剂冲洗。
6)
避免长时间压力变化:
避免频繁地改变流速或压力,以防止柱床压缩或损坏。
7)
柱温的控制:
不要超过色谱柱的最高使用温度,以避免填料退化。
8)
定期
柱效测试:
定期进行柱效测试,记录塔板数与压力,监控色谱柱的性能变化。
(仅供参考,一般柱效测的物质都是小分子,如果是蛋白药物的检测没有参考意义,有可能已经拖尾或者分离度变差了,但柱效依然可以。)
02.反相色谱柱的注意事项
1)
pH值限制:
由于大多数RPC使用硅胶作为基质,应避免在pH值低于2或高于7.5的环境中使用,以防硅胶溶解或键合相水解。
(不过现在有些厂家的反相色谱柱可以做到2~11,但还是不推荐大家极限使用)
2)
流动相组成:
确保流动相的组成与色谱柱兼容,避免使用会与色谱柱发生反应或沉淀的溶剂。
3)
样品兼容性:
确保样品溶剂与流动相兼容,避免样品中的溶剂在色谱柱中沉淀或与固定相发生不可逆吸附。
4)
样品纯度:
样品应尽可能纯净,以避免污染色谱柱。建议使用0.22μm或更小孔径的过滤器过滤样品。
5)
避免颗粒物:
防止颗粒物进入色谱柱,这可能会损坏固定相或堵塞柱筛板。
6)
柱压监测:
定期检查柱压,异常的柱压升高可能是由于样品或流动相中的颗粒物、色谱柱损坏或其他问题。
7)
避免极端温度:
不要将色谱柱暴露在极端温度下,这可能会损坏固定相或改变其性能。
8)
记录使用情况:
记录色谱柱的使用情况,包括使用针数、理论塔板数、分离度、拖尾因子等,有助于追踪色谱柱的性能变化。
9)
柱子更换:
当色谱柱性能下降,如出现峰形变宽、分辨率降低或重现性差时,应及时更换色谱柱。(柱子再生一般效果微弱,色谱柱如果价格不高的话,不推荐此操作。)
总结一下:
简单来说,维护反相色谱柱就像照顾一位挑剔的朋友:新柱到手,先用纯有机溶剂好好洗个澡,去除杂质。使用时,确保流动相和样品都干干净净,避免颗粒物和微生物的污染。
如果样品比较脏或者流动相不够纯,别忘了在前面加个保护柱,这样能防止颗粒物伤害你的色谱柱。
不用的时候,记得保存在合适的溶剂中,别让它干涸或受潮。
使用过程中,避免频繁改变流速和压力,也别让它经历极端的温度变化。
定期检查一下它的“健康”,比如柱压和柱效,这样你就能及时发现问题,及时处理。
最后,如果它真的表现不佳了,也别勉强,及时更换新的色谱柱,以免影响你的实验结果。
近期热榜
迎国庆送壕礼!十月发帖抢大疆云台
【官方邀请】高效液相色谱使用情况有奖调研
喜迎国庆!第十七届原创大赛超级原创日参赛奖励翻倍
丹纳赫四十周年寄语征集领大礼包
热门活动
【售后专场--招聘会】
第三届微课大赛投票进行中ing
猜你喜欢
最新推荐
热门推荐
更多推荐
小白求助大神岛津液相压力问题
求助
2016/07/16
【金秋计划】+检测二氯喹啉酸残留,色谱条件:流动相为乙腈:水(V/V)=1:1,水用磷酸调到pH=4;流速1mL/min;波长225nm;进样量20μL。此条件下,标样出峰时间较早,保留时间4min左右,样品峰分不开。调整了流动相比例,乙腈:水(V/V)=1:3,保留时间15min左右,但峰高和峰面积明显降低,且浓度较低时不出峰,怎样解决?
分享
2024/09/09
【讨论】实验室的仪器没接地线会怎么样??
2016/12/22
【求助】关于加标回收如何去做?
2009/10/21
胭脂红和胭脂虫红是一个东西吗
求助
2011/11/25
【求助】液相图谱相关问题!!!
2011/06/10
安捷伦液相色谱仪排气阀漏液
2021/01/02
有没有做染料检测的,进来交流一下
2006/03/27
高效液相色谱基础篇|关于反相色谱柱维护保养及注意事项小知识
分享
2024/09/30
高效液相色谱基础篇|关于反相色谱柱使用的小知识
分享
2024/09/30
高效液相色谱基础篇|关于色谱柱平衡的小知识
分享
2024/09/30
高效液相色谱基础篇|关于接头的小知识
分享
2024/09/30
高效液相色谱基础篇|关于管线使用的小知识
分享
2024/09/30
高效液相色谱基础篇|关于系统适用性标准考量的小知识
分享
2024/09/30
全新安捷伦液相1290急出
原创
2024/09/30
高效液相色谱基础篇|关于仪器常用固件上的小知识
分享
2024/09/30
实验室容量瓶、移液管等玻璃器皿检定
求助
2024/09/25
标准溶液该如何配置?
第十七届原创
2024/09/25
微量注射器用移液器检定规程出具证书,带CNAS logo,合理吗?
求助
2024/09/25
关于气相基线高一倍求助
求助
2024/09/24
如果计量器具较小,校准标签贴不开怎么办?
求助
2024/09/26
【求助】申请CNAS实验室认可,文审阶段老师提出我司的组织机构图中未体现有关部门对实验室的支撑关系。请问如何修改?
求助
2024/09/24
粪大肠阴性对照 产气肠杆菌的测定
求助
2024/09/25
氟化物数据不稳定
求助
2024/09/25
共聚焦显微镜多少钱
原创
2024/09/30
食品检测的仪器设备有哪些
原创
2024/09/30
exafs测试表征什么
原创
2024/09/30
高效液相色谱基础篇|关于反相色谱柱使用的小知识
分享
2024/09/30
定量分析和定性分析的区别与联系
原创
2024/09/30
帮忙下载一篇Handbook of Optical Biomedical Diagnostics, Second Edition, Volume 2: Methods
求助
2024/09/30
帮忙下载一篇Optics Using MATLAB
求助
2024/09/30
酸碱滴定法的原理
原创
2024/09/30
品牌合作伙伴
丹纳赫苏州基地 打工人的梦想
岛津
日立科学仪器
珀金埃尔默仪器(上海)有限公司(PerkinElmer)
日本电子株式会社
丹纳赫
安捷伦
赛默飞世尔科技
普析通用
欧波同
天美
天瑞仪器
德国耶拿
海能技术
马尔文帕纳科
磐诺科技
上海仪电科仪
梅特勒托利多
聚光科技
莱伯泰科
盛瀚
多宁生物
丹东百特
科哲
卓立汉光
屹尧科技
华谱科仪
宝德仪器
优莱博
HORIBA
布鲁克核磁
举报帖子
执行举报
点赞用户
好友列表
加载中...
正在为您切换请稍后...