02.固定相与流动相的作用 1)固定相(Stationary Phase)的作用: a. 提供相互作用表面:固定相具有特定的化学性质(如疏水性),能够与样品中的不同分子产生相互作用,如吸附、离子交换或化学键合等。 b. 分离基础:固定相的化学和物理性质是实现样品分离的基础。在反相色谱中,固定相通常是疏水性的,与样品中的疏水性分子相互作用较强。 c. 影响保留时间:固定相的性质直接影响样品分子在色谱柱中的保留时间,即分子在色谱柱中移动的速度。 2)流动相(Mobile Phase)的作用: a. 携带样品通过色谱柱:流动相是推动样品分子通过色谱柱的介质,通常是一种或多种溶剂的混合物。 b. 调整分离选择性:通过改变流动相的组成(如有机溶剂和水的比例)、极性或pH值,可以调整样品分子与固定相之间的相互作用强度,从而影响分离效果。 c. 影响保留时间和选择性:流动相的极性越强,疏水性分子与固定相的相互作用越弱,分子的保留时间越短。反之,流动相的极性越弱,保留时间越长。 d. 影响色谱峰的形状:流动相的组成和性质还会影响色谱峰的对称性和分辨率。