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开个新贴,有关水质粪大肠检测质控样品和定量标准菌株使用的欢迎交流。

  • Insm_a9615aaa
    2019/09/12
  • 私聊

环境监测政策法规

  • 关于水质粪大肠菌群的测定多管发酵法标准菌株与标准样品选用解读
    2018年12月26日,生态环境部发布了HJ/T 347.2-2018《水质粪大肠菌群的测定多管发酵法》行业标准,该标准是对HJ/T 347-2007《水质粪大肠菌群的测定多管发酵法和滤膜法(试行)》中多管发酵法的修订和取代,于2019年6月1日正式实施,适用于地表水、地下水、生活污水和工业废水中粪大肠菌群的测定。

    与HJ/T 347-2007标准相比,新版标准新增了多管发酵法的精密度、准确度、阳性和阴性对照、培养基检验等相关内容。实验室需要购买阳性质控菌株大肠埃希氏菌和阴性质控菌株产气肠杆菌作为标准阳性和阴性对照,本中心根据标准对菌株特性要求,筛选了两株标准菌株,具体特性见下,供实验室参考。,满足客户在新标准应用过程中的方法验证、质量控制、人员考核等方面需求。

    CICC 10389大肠埃希氏菌Escherichia coli

    l 形态学:

    菌体形态:

    营养琼脂(NA)培养基,36℃±1℃培养18h,菌体短杆状,(0.6~0.7)μm×(1.0~1.7) μm,革兰氏阴性,单个、成对或成堆排列,不产芽胞。

    菌落形态:

    营养琼脂(NA)培养基,36℃±1℃培养18h,菌落乳白色,圆形,表面光滑、湿润,不透明,边缘整齐。

    l 关键特性:

    乳糖蛋白胨培养基 37℃±0.5℃,24h产酸产气

    EC肉汤培养基 44.5℃±0.5℃,24h产酸产气



    44.5℃±0.5℃,24h产气




    A2. 乳糖蛋白胨培养基:产酸产气。B2. EC肉汤:发酵产气。

    A1和B1.空白对照

    CICC 10293产气肠杆菌Enterobacter aerogenes

    l 形态学:

    菌体形态:

    营养琼脂(NA)培养基,36℃±1℃培养18h,菌体短杆状,(0.5~0.6) μm×(0.7~1.7) μm,革兰氏阴性,单个、成对或成堆排列,不产芽胞。

    菌落形态:


    营养琼脂(NA)培养基,36℃±1℃培养18h,菌落灰白色或乳白色,圆形,表面光滑、湿润,不透明,边缘整齐
    关键特性:乳糖蛋白胨培养基 37℃±0.5℃,24h产酸产气;EC肉汤,44.5℃±0.5℃,24h微弱生长,不产酸产气。
    有了对的标准菌株,实验室在做的过程中还有一道槛,那就是要做标准菌株的确认、保藏,还要制备成定量的菌悬液,在制备定量产品过程中,等计数结果出来,原来的菌悬液的浓度就又变了,要知道,大肠的菌悬液是非常不稳定的。根据HJ/T 347.2-2018《水质粪大肠菌群的测定多管发酵法》标准要求,实验室在样品检测和培养基验证过程中,可直接使用国家级菌种中心生产加工的定量标准菌株产品。因此,实验室可以直接采用定量标准菌株,中国工业微生物菌种保藏管理中心(CICC)研制开发了大肠埃希氏菌定量标准菌株CICC 10389-HQA和产气肠杆菌定量标准菌株CICC 10293-HQA产品,浓度范围300~3000MPN/L,附带证书,实验室水化溶解后即可使用。产品是下面这样式儿滴,可以省实验室好多精力。



    质控样品选择

    目前市面上绝大多数粪大肠质控样品为食品检测用,切记,食品的粪大肠菌群样品不适用于水质的粪大肠检测,为什么?请看下面HJ 347.2和GB 4789.39-2013 《食品安全国家标准 粪大肠菌群计数》的 区别:
    序号 项目 HJ 347.2-2018 GB 4789.39-2013
    1 接种量不同 10mL, 1mL, 0.1mL 0.1mL, 0.01mL, 0.001mL
    2 计数方法不同 3?5管法 3?3管法
    3 初发酵培养基不同 乳糖蛋白胨培养基 月桂基硫酸盐胰蛋白胨(LST肉汤)
    4 初发酵培养条件不同 37℃?0.5℃, 24h?2h 36℃?1℃, 48h?2h
    5 MPN表不同
    6 MPN表中单位不同 MPN/100mL MPN/mL(g)
    7 结果报告不同 MPN/L MPN/mL(g)

    因此,选择合适的质控样品对于实验室非常重要,主要看其赋值所采用的方法是否与HJ 347.2一致。中国工业微生物菌种保藏中心研制的HJQC-001水质粪大肠菌群质控样品,完全适用于新标准应用过程中的方法验证、质量控制、人员考核等要求。

    针对以上内容 欢迎留言交流!



    EC肉汤

    同时研制推出了HJQC-001水质粪大肠菌群质控样品,满足客户在新标准应用过程中的方法验证、质量控制、人员考核等方面需求。
    44.5℃±0.5℃,24h不产酸不产气
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  • Insm_a9615aaa

    第1楼2019/09/12

    应助达人

    有的实验室采购人员会采购到食品粪大肠菌群的质控样品,切记,食品的粪大肠菌群样品不适用于水质的粪大肠检测,为什么?请看下面HJ 347.2和GB 4789.39-2013 《食品安全国家标准 粪大肠菌群计数》的 区别:
    序号    项目    HJ 347.2-2018    GB 4789.39-2013
    1    接种量不同    10mL, 1mL, 0.1mL    0.1mL, 0.01mL, 0.001mL
    2    计数方法不同    3?5管法    3?3管法
    3    初发酵培养基不同     乳糖蛋白胨培养基    月桂基硫酸盐胰蛋白胨(LST肉汤)
    4    初发酵培养条件不同    37℃?0.5℃, 24h?2h     36℃?1℃, 48h?2h
    5    MPN表不同       
    6    MPN表中单位不同    MPN/100mL    MPN/mL(g)
    7    结果报告不同    MPN/L    MPN/mL(g)
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  • 故道瓦罐

    第2楼2019/09/12

    应助达人

    就是那个质控样太贵了啊,单独做一个样成本有点大,自己配符合条件的浓度也不知道怎么操作,就是很麻烦

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  • Insm_a9615aaa

    第3楼2019/09/12

    应助达人

    进口的贵,国产的价格只有进口一半呢。

    故道瓦罐(v3027973) 发表:就是那个质控样太贵了啊,单独做一个样成本有点大,自己配符合条件的浓度也不知道怎么操作,就是很麻烦

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  • 故道瓦罐

    第4楼2019/09/15

    应助达人

    CICC的质控样卖600一个,如果按照一次性使用的话,着实有点小贵啊,自己传代再配制相应浓度的,也不知道怎么做

    Insm_a9615aaa(Insm_a9615aaa) 发表: 进口的贵,国产的价格只有进口一半呢。

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  • andyzuo

    第6楼2019/09/17

    CNAS AL001中可用阳性样品

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  • 未曾下雨

    第7楼2019/09/18

    你好,我们买的是定性的菌株,按照说明书在营养琼芝培养基上复苏培养,传代,使用的时候怎么把它配成菌悬液呢?挑一些菌落用无菌水或者生理盐水稀释吗?

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  • 老兵

    第8楼2019/09/23

    应助达人

    证书要有国家标物或标样生产许可的批号和批文就好了。

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  • 瓜皮卢

    第9楼2019/09/24

    最近正在为这个标准的方法验证发愁,真是太好了

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  • Insm_a9615aaa

    第10楼2019/10/11

    应助达人

    已经在申请了 很快会立项的

    老兵(wangliqian)发表:证书要有国家标物或标样生产许可的批号和批文就好了。

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