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测毛细管中溶液拉曼如何聚焦?

  • Insm_79557fb8
    2019/11/04
  • 私聊

拉曼光谱

  • 本人最近用拉曼测液体抗生素的拉曼信号,用毛细管来装样品显微聚焦,,但是经常测出来玻璃的信号,请问拉曼聚焦操作方面有什么技巧吗?或者说在屏幕上看到怎样的图案才算是聚焦到液体了?还有一个问题请教,文献中用的是600多的激光,我用500多的测抗生素会不会差别很大?
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  • 拉曼论坛

    第1楼2019/11/23

    可以采用激光聚焦,观察激光光斑的反射,第一次聚焦到最小是毛细管的外壁,继续移动载物台,再次观察到激光聚焦则是毛细管的内壁。

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  • Ins_6851bcfc

    第2楼2021/05/12

    老师你好,我是研一刚入门的小白,之前也用毛细管测过,总是对焦不好,测不出来峰,请问激光聚焦到内壁或者外壁的时候是不是先是一片白,很亮,之后出现的就是内外壁,然后再往里走就是要测的基底对嘛?

    拉曼论坛(nanbowan) 发表:可以采用激光聚焦,观察激光光斑的反射,第一次聚焦到最小是毛细管的外壁,继续移动载物台,再次观察到激光聚焦则是毛细管的内壁。

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  • 拉曼论坛

    第3楼2021/05/14

    用白光直接聚焦有点麻烦,很多观察不清楚,尤其是内壁的时候,没有参照物(灰尘颗粒等)

    如果能从摄像头观察激光,利用聚焦好后激光斑点小的特点实现聚焦。

    如果只能用白光聚焦,有没有柯勒照明(显微镜照明光光路的一个大小可调的光阑,能实现照明光场均匀)?柯勒照明的光阑的边缘清晰的时候也是聚焦好的。

    前两个都没有的话,聚焦到最好的时候是反射光最强的时候(一片白,很亮),这个在聚焦到外壁的时候很明显,但是到内壁的时候不是特别明显,需要仔细观察光强变化(摄像头观察的话可能会受自动曝光时间等摄像头参数影响),在外里走就是基底。这个和你观察的效果一样的。

    建议先用信号强的样品,例如有机溶剂,记下白光最强后移动多少距离信号最强,再去测信号弱的样品,信号弱的样品的位置参考记下的距离,长时间累加信号。

    Ins_6851bcfc(Ins_6851bcfc) 发表: 老师你好,我是研一刚入门的小白,之前也用毛细管测过,总是对焦不好,测不出来峰,请问激光聚焦到内壁或者外壁的时候是不是先是一片白,很亮,之后出现的就是内外壁,然后再往里走就是要测的基底对嘛?

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  • Ins_6851bcfc

    第4楼2021/05/18

    谢谢老师的指导!柯勒照明我们这好像没有,所以我会听取您的建议,下次测拉曼的时候好好实践一下。

    拉曼论坛(nanbowan) 发表: 用白光直接聚焦有点麻烦,很多观察不清楚,尤其是内壁的时候,没有参照物(灰尘颗粒等)如果能从摄像头观察激光,利用聚焦好后激光斑点小的特点实现聚焦。如果只能用白光聚焦,有没有柯勒照明(显微镜照明光光路的一个大小可调的光阑,能实现照明光场均匀)?柯勒照明的光阑的边缘清晰的时候也是聚焦好的。前两个都没有的话,聚焦到最好的时候是反射光最强的时候(一片白,很亮),这个在聚焦到外壁的时候很明显,但是到内壁的时候不是特别明显,需要仔细观察光强变化(摄像头观察的话可能会受自动曝光时间等摄像头参数影响),在外里走就是基底。这个和你观察的效果一样的。建议先用信号强的样品,例如有机溶剂,记下白光最强后移动多少距离信号最强,再去测信号弱的样品,信号弱的样品的位置参考记下的距离,长时间累加信号。

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