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用HPLC检测水稻中直链淀粉和支链淀粉的方法

测试版面

  • 关于液相的一些检测器,色谱柱的匹配的问题还不大了解。
    现在做水稻中直链淀粉(amylose)、支链淀粉(amylopectin)的分析。

    用的Waters 公司的色谱仪。已经订购了PDA检测器,想买柱子。

    如果要用PDA检测器作分析的话,检测直链淀粉、支链淀粉选用什么类型的色谱柱比较好呢(公司、型号方面的信息)?
    有高手有这方面的经验吗,望不吝赐教!
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  • kite503

    第1楼2019/11/12

    一、纤维素及其衍生物类手性柱

    纤维素型手性色谱柱的分离作用包括相互吸引的作用及形成包埋复合物。手性选择性强,通用性好,能够分析的手性化合物范围及为广泛。

    1、 RC-OD,涂敷3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯手性柱,是目前应用最为广泛的手性柱之一。适用于分离类固醇、 β阻断剂类等。

    2、 RC-OC,涂敷对氯甲基苯基氨基甲酸酯手性柱,用于一些特别化合物的分离,例如奥沙利铂。

    3、 RC-SCEP,键合对氯甲基苯基氨基甲酸酯手性柱,RC-OC的键合型。

    4、 RC-AD柱,5-氯-2-甲基苯基氨基甲酸酯直链淀粉手性柱。

    直链淀粉代替纤维素制成的此类手性柱显示了和纤维素柱不同的选择性,但是稳定性较差。因为淀粉是水溶性的,因此流动相中必须绝对无水才能保证柱子寿命。

    二、环糊精类手性柱

    β-环糊精手性固定相应用范围最广。由于形成包合物速度较慢,因此可能导致色谱峰峰形较差,同样也影响了其在制备色谱中的应用。但其在有机溶剂内的超强稳定性、在各PH值下的稳定性以及其有效的分离强度,使其成为手性制备最主要的填料。这类填料是我公司目前制备分离的首先填料。

    1、 RC SCDP单键合苯基氨基甲酸酯化β-环糊精手性柱,用于分离多种光学异构体,正反相通用、高效,耐剂能力强,适合于做制备。广州研创生物技术有限公司专利产品。应用范围广,对含苯基、萘基、氰基的化合物有良好的分离效果。可用于模拟移动床SMB色谱的大规模分离,多种粒径可供选择, 并有Kg级的大包装。优良的性能价格比。粒径:5,10, 20, 50μm;孔径:100Å、120Å、200Å;适用pH范围:2.0-8.0

    2、 RC MCDP多键合苯基氨基甲酸酯化β-环糊精手性柱,正反相通用、高效,耐剂能力强,适合于做制备。其水相比例最大达95%以上。同样对含苯基、萘基、氰基的化合物有良好的分离效果。相对SCDP而言更适合于反相应用。分离拉米夫定、盐酸帕洛诺斯琼、格隆溴铵等多手性化合物时效果良好。可用于模拟移动床SMB色谱的大规模分离,多种粒径可供选择, 并有Kg级的大包装。粒径:5,10, 20, 50μm;孔径:100Å、120Å、200Å;适用pH范围:2.0-8.0

    3、 RC SCBE特种β-环糊精手性柱,开发目的主要是用于分离氯吡格雷,以解决粘孵蛋白柱寿命过短的问题,现在还有应用于分离伏立康唑等康唑类手性化合物。

    三、 RC-BSA牛血清蛋白手性柱

    • 牛血清白蛋白(BSA)为球型蛋白,分子量为66,000,等电点为4.7。此蛋白为一个单氨基酸链,通过17个二硫键形成9个双环。许多化合物通过牛血清白蛋白手性色谱柱得到分离。牛血清白蛋白不如α-酸性糖蛋白稳定,一些有机溶剂(如乙腈、甲醇)可使蛋白变性,因此使用起来要特别注意。

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