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酶标仪与分光光度计的优缺点

lijing320323

2019/11/22

酶标仪和分光光度计都是实验室常用的分析测量工具，它们的测定原理是相同的，都是使用朗伯-比耳定律，测定的都是样本的吸光度。

一、酶标仪和分光光度计的三大差别

酶标仪即酶联免疫检测仪。是酶联免疫吸附试验的专用仪器又称微孔板检测器。可简单地分为半自动和全自动2大类，但其工作原理基本上都是一致的，其核心都是一个比色计,即用比色法来进行分析。测定一般要求测试液的最终体积在250μL以下，用一般光电比色计无法完成测试，因此对酶标仪中的光电比色计有特殊要求。

分光光度计，又称光谱，是将成分复杂的光分解为光谱线的科学仪器。测量范围一般包括波长范围为380~780 nm的可见光区和波长范围为200～380 nm的紫外光区。不同的光源都有其特有的发射光谱,因此可采用不同的发光体作为仪器的光源。

同为，实验室内测定吸光度的仪器，酶标仪和分光光度计存在一些不同之处，具体差别体现在以下三个方面：

（1）盛装待测溶液的容器：

分光光度计用的是比色皿，酶标仪使用的是塑料微孔板(酶标板)。比色皿只能起到盛装溶液的作用，每个比色皿一次只能盛装一种溶液。酶标板常用透明的聚乙烯材料制成，对抗原抗体有较强的吸附作用，因此用它作为固相载体，酶标板通常为48孔或96孔，每个微孔可以盛装不同的溶液。

（2）光路的方向：

分光光度计是水平光路，而酶标仪则是垂直光路。由于酶标板盛样本的塑料微孔板是多排多孔的,光线只能垂直穿过,因此酶标仪的光束都是垂直通过待测溶液和微孔板的,光束既可是从上到下,也可以是从下到上穿过比色液。垂直光的特点是标本吸光度受液体浓缩或稀释的影响小，不足之处是受被测样本液面是否水平、酶标板透光性、孔底是否平整等的影响较大。

（3）光路的长度：

由于光密度(OD值)与吸光系数, 待测组分的浓度以及光路长度成正比关系。

分光光度计采用的比色杯的宽度通常是1cm，所以光路长度固定为1cm。因此不同仪器，不同批次测量的数据具有同样的可比性。

而酶标仪采用的是垂直光路, 所以光路的长度应该是液体液面的高度。所以测得的值受到样品的体积的影响。

二、酶标仪和分光光度计的优缺点比较

分光光度计：

优点：1、检测波长范围较宽；2、加样量不一致对测量结果没有影响。

缺点：1、工作量大，操作繁琐，耗时；2、耗试剂；3、结果稳定性差，重复性较差，误差较大；4、对于微量物质，难以检测到。

主要应用领域：药品检验、药物分析、环境检测、卫生防疫食品、化工、科研等领域对物质进行定性、定量分析。

酶标仪：

优点：1、一次性处理样品量大，省时；2、样本、试剂用量少；3、操作简单，重复性好，检测速度快、效率高。

缺点：1、酶标仪96孔板在紫外光区有较强的紫外吸收，应尽量避免在300nm以下使用酶标仪进行含量测定；2、必须确保微孔板每个孔加样量严格一致，对实验者的操作技能提出了更高的要求。

主要应用领域：临床检验、生物学研究、农业科学、食品和环境科学等。

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荷花仙子

第1楼2019/11/24

分光光度计也属于光谱啊

0

荷花仙子

第2楼2019/11/24

酶标仪一次性处理样品量大，省时间。

0

吕梁山

第3楼2019/11/25

一个是单波长，一个是多波长

0

yifan1117

第4楼2019/11/28

各有所长吧。

0

Ins_fd543709

第5楼2022/12/11

带有自动光路校正的酶标仪不就可以避免“加样量必须完全一致”这个要求较高的操作了？！

0

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